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广西巴马小型猪PERV-env基因克隆及其组织表达谱分析

2017年03月22日 浏览量: 评论(0) 来源:中国比较医学杂志 2017年第1期 作者:钟华 潘汉世 马玲 龙寒 陈凤莲 廖艳娟 唐海波 吴健敏 责任编辑:admin
摘要:本试验通过RT-PCR技术从巴马小型猪外周血淋巴细胞中克隆PERV-env基因,并以巴马小型猪PERV-env基因中TM蛋白编码区为模板设计引物,应用半定量RT-PCR方法对巴马小型猪各个组织中PERV-env基因的mRNA丰度进行检测,以了解广西巴马小型猪各组织器官中PERV的表达情况,为临床异种移植选择低拷贝负载的猪器官、组织或细胞提供依据,同时也为进一步开展异种移植的安全性评估打下基础。

目的:克隆广西巴马小型猪PERV-env部分基因,并研究其在不同组织中的表达差异。

方法利用RT-PCR方法从巴马小型猪外周血白细胞中扩增PERV-env基因,并与部分国内外已发表的PERV-env基因序列进行同源性及遗传进化分析。以扩增获得的广西巴马小型猪PERV-env基因为模板设计引物,利用半定量RT-PCR的方法对广西巴马小型猪不同组织中PERV mRNA表达情况进行分析。

结果在所检测的9个组织样品中PERV mRNA相对表达水平存在差异,肾及外周血淋巴细胞中PERV mRNA丰度最高,肺、心、肝、脾、胸腺、卵巢次之,且表达丰度差异不显著(P>0.05),胰腺PERV mRNA表达丰度最低。

结论以巴马小型猪胰岛细胞进行异种移植发生PERV感染的潜在危险性可能要低于其它器官,但仍需进一步研究证实。

 

全文阅读:广西巴马小型猪PERV-env基因克隆及其组织表达谱分析

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