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实验用小型猪乙型脑炎病毒的分离鉴定
2017年04月17日
来源:中国比较医学杂志 2017年第3期
作者:王吉 付瑞 李晓波 王淑菁 巩薇 卫礼 岳秉飞 贺争鸣
责任编辑:admin
摘要:本研究从北京市某小型猪场的3头猪脑组织中分离到的3株乙型脑炎病毒,并进行形态学、血清学和分子生物学鉴定。
目的: 了解小型猪感染乙型脑炎病毒株的特点。
方法: 猪脑组织经过处理,接种BHK21细胞,进行病毒培养、间接免疫荧光试验、中和试验、电镜观察,及通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增新分离毒株E区段和PrM区段核苷酸序列,测序后进行基因型鉴定。
结果: 25只猪脑组织接种BHK21细胞,有3个组织处理液能使BHK21细胞发生圆缩、集聚等病变;3个组织接种的BHK21病变细胞滴片进行免疫荧光试验,均产生强绿色荧光反应;中和实验结果显示3株新分离株中和效价均为1∶64;电镜下可见直径40nm左右球型病毒粒子;RT-PCR产物测序结果与疫苗株E区段核苷酸比较同源性均为95%;3株新分离株均为GⅢ型乙脑病毒。
结论: 实验表明小型猪场存在乙型脑炎病毒感染,为GⅢ型乙型脑炎病毒。
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