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小鼠和大鼠取血指导原则
2017年04月29日
来源：https://oacu.oir.nih.gov/animal-research-advisory-committee-guidelines
作者：李晓菲译
责任编辑：admin
摘要：该指导原则是基于同行评议和NIH积累的数据和经验。介绍了大小鼠采血方法及优缺点。
该指导原则是基于同行评议和NIH积累的数据和经验。实验人员和兽医应该决定用哪种方法进行抽血。与任何实验操作一样，抽血培训是至关重要的。选择方法时应考虑实验人员操作的舒适程度，及抽取样品的体积和频率。调查员和IACUC有责任确保使用的操作技术和方法对实验动物造成最少的疼痛和痛苦，且同时能满足实验需求。指导原则外的任何操作，例如，增加收集血液量或不使用麻醉情况下进行眼眶取血都必须由IACUC的指导，并且阐述科学理由且获得IACUC批准。
获得培训和有经验的人员对选择操作方法是很重要的。培训的人员包括实验员、兽医、新入职员工。IACUC应建立问责制监督其人员的培训。所有程序必须经IACUC审查并获得批准。选择适合手目的的取血技术应考虑的因素包括，但不限于：
- 取血的物种
- 被取血动物的大小和估计的总取血量。
- 所需样本类型（如血清、全血细胞等）。
- 所需样品的质量（无菌，组织液污染等）
- 所需血液量。
- 采样频率
- 被取血动物的健康状况。
- 经训练和有经验的兽医师
- 取血部位、保定或麻醉对血液参数的影响。
血液采样的可接受数量和频率取决于动物循环血量和红细胞（RBC）周转率。啮齿动物近似循环血容量为55至70毫升/公斤。循环血量，抽取约10%的总体积需2至4周恢复，7.5%需7天恢复， 1%需24小时恢复.抽取大于推荐值的体积应获得IACUC批准，并给予补充液体。根据体重需要的血液样本范围体现在表1。
指南最常用的取血点：A）眼眶；B）面静脉；C）隐静脉；D）尾静脉；E；颈静脉。心脏穿刺取血考虑安乐死程序，只有在确保该动物处于深度麻醉，如缺乏对疼痛刺激的反应（例如，捏脚趾或尾巴）情况下实施。
眼眶后静脉窦取血：
- 用毛细管或巴斯德吸管经眶后窦穿刺可用于大鼠取样。
- 快速-多数动物可在短时间内流血。
- 可获得血量：中到大。
- 良好的样品质量。如果使用局部麻醉剂存在潜在的污染
- 重复采样同一部位取血至少10天，允许组织进行修复。否则，愈合过程可能会干扰血液流动。
- 不应双眼交替获取血液。
- 不熟练的医师眼眶采样比其他采血途径有更大的导致并发症潜力。
- 在小鼠，如果与实验设计相兼容建议全身麻醉后采血。
- 如果眶后采血未进行全身麻醉，在应用程序之前使用丙美卡因或丁卡因滴眼液。
- 大鼠中，静脉丛而不是窦的存会可以导致更大的眼眶组织损伤，同小鼠相比。
- 必须使用麻醉方法，除非获得IACUC批准。
- 在操作前使用外用眼麻醉剂，例如，丙美卡因或丁卡因。由于解剖大鼠眼眶丛，ARAC认为眼眶出血的大鼠超过"最小或短暂的痛苦和痛苦"，被归为疼痛D级。
- 小鼠和大鼠，必须小心操作且能确保充分的止血。
- 推荐使用无菌毛细管和移液器有助于避免眶周感染和潜在的眼睛长期损害。管子的边缘应光滑减少眼损伤的可能性。
面部静脉取血（限于成年小鼠）：
- 获得血容量：中到大。
- 重复采样可以面两侧交替进行。
- 样本可能是静脉和动脉血的混合物
- 手动约束清醒动物的结果是对准适当的位置和压迫静脉血流量。
- 可以快速和使用最少的设备，允许快速完成.
- 样品体积可通过针的大小（20G或更小）部分控制。
- 这种方法比眶后缺血临床化学值可能会更高。
隐静脉采血：
- 用针穿刺大隐静脉可用于大鼠和小鼠。
- 获得血容量：小到中等。
- 可变样本质量
- 这个操作通常是在清醒的动物身上完成的，但需要有效的保定
- 需要比眶后取血和尾静脉缺血更多的训练来获取血量
- 虽然道德上比眼眶取样更可以接受的，长时间的保定清醒动物时，其准备时间会增加动物的痛苦。
- 在抽取部位使用无菌凡士林，有助于血液流动获得更多的总血量。
- 如需连续抽取，可去除小的凝块。
侧尾静脉或腹背动脉取血：
- 在大鼠和小鼠侧位静脉上均可通过插入插管抽取。
- 在大鼠和小鼠上很容易获取样品，但是尾部切口样品很容易被组织污染。样品的质量随着长时间的出血和尾巴的"挤奶"而减小。
- 样品收集使用针（插管）能最大限度地减少污染，但小鼠较难操作。
- 血容量：动脉-中到大。静脉-一般较小。动脉采样速度快能产生较大的体积，但必须特别注意，确保充分止血。由于这个原因，动脉只在需要较大体积血量时使用。
- 可以重复采血
- 在大多数情况下，用循环温水袋来加热尾巴可获得较多的血量。
- 插针和尾部切口无需麻醉，但是需要有效的保定。
夹尾取血
- 可以通过在大鼠和小鼠用（如夹住）小鼠尾部不超过1mm或大鼠尾部不超过2 mm的远端。
- 样品被组织污染
- 样品质量随时间的延长和"挤奶"的尾巴变差
- 获得的血容量：小。
- 重复的收集是可能的。
- 在大多数情况下，借助热灯或热压缩来加热尾巴会增加
- 进行尾夹时，应考虑麻醉/镇痛，如果局部低温麻醉剂被使用，血液会随着尾巴的再次变暖而流动。如果局部麻醉，需要充分接触时间使其生效。
颈静脉取血（限于大鼠）：
- 获得血容量：中到大。
- 获得高质量样品。
- 颈静脉取样可进行无需麻醉，虽然使用麻醉能大大促进操作程序。
- 不适宜反复重复采样。
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