半胱胺诱发十二指肠溃疡动物模型
(1)复制方法 成年大鼠,禁食不禁水24h,一次性皮下注射给盐酸半胱胺400mg/kg体重,或皮下注射300mg/kg体重,间隔6h按100mg/kg体重剂量同途径再给药一次。于首次给药后24h拉颈脱臼法将动物处死,取胃和近端十二指肠(幽门下约5cm),沿胃大弯和十二指肠系膜对侧将标本剪开,观察十二指肠损伤情况,计算成溃疡指数,同时,测定胃和十二指肠内容物的pH值,十二指肠壁结合黏液量,十二指肠组织DNA合成速率,以及检查十二指肠组织形态学改变。溃疡指数的计算方法由溃疡深度指数分值和表面损伤指数分值累计而成。深度指数的计分标准为:无损伤:0分;黏膜层坏死:1分;溃疡达肌层:2分;几乎或刚穿透浆膜:3分;穿孔并与肝、胰等邻近组织粘连或肠内容物外泄:4分。表面损伤指数的计分标准是:损伤面长径<2mm:0分;长径为2~5mm:1分;长径>5mm:2分;损伤面占整个标本面积的一半以上:3分。
(2)模型特点 一次性皮下注射给盐酸半胱胺400mg/kg体重,模型动物十二指肠主要表现为黏膜糜烂和溃疡,溃疡面较大,直径达2~8mm,深度达黏膜层或黏膜下层,十二指肠腺消失,溃疡处有颗粒样组织形成,上皮细胞脱失或变性。间隔6h分二次皮下注射盐酸半胱胺300和100mg/kg体重,模型动物十二指肠表现为深度溃疡,并弥散到其邻近的脏器(如肝、脾、网膜等),溃疡深达肌层或外膜,有的出现穿孔,十二指肠腺坏死,上皮细胞脱失,粒化组织形成,造模50d时这些症状仍未见有明显的改善。
(3)比较医学 胃酸分泌过多和黏膜屏障受损是诱发十二指肠溃疡的两个重要因素。在生理情况下,十二指肠腔内的碱性液体可中和胃酸,十二指肠分泌的结合黏液以稳定连续的凝胶状态附着在肠黏膜表面,并与黏膜分泌的HCO3-一道构成黏液-HCO3-屏障,对十二指肠起到了一定的保护作用。在病理情况下,如胃酸分泌过多,或十二指肠泌碱能力不足,或肠蠕动过快,碱性液体不能到达十二指肠近端对酸进行中和,则可导致十二指肠酸化。当过高的胃酸和胃蛋白酶的侵蚀作用与十二指肠黏膜的防御功能之间失去平衡时,十二指肠溃疡随之形成。半胱胺(Cysteamine,CS)又称β-巯基乙胺,是辅酶A的组成部分,因其含有活性的巯基和氨基而具有多种生物功能。当给动物体内注入过量的半胱胺时,可降低其十二指肠对酸的处置能力,抑制碳酸酐酶、 ATP酶和碱性磷酸酶的活性,损害勃氏腺分泌黏液的功能,减少腺内黏液和黏液糖蛋白的含量,使十二指肠黏液- HC03-屏障功能受损,导致溃疡的发生。半胱胺诱发的动物十二指肠溃疡,其类型和病理变化与半胱胺注射剂量和方法显著相关。一次性皮下注射给盐酸半胱胺400mg/kg体重,模型动物表现为急性非弥漫性十二指肠溃疡。间隔6h分二次皮下注射盐酸半胱胺300和100mg/kg体重,模型动物表现为慢性弥漫性十二指肠溃疡。由于本模型的病理特征与人类的临床表现十分相似,且方法简单易行,故已成为目前使用频率最高的十二指肠溃疡模型之一。