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双荧光标记的胶质瘤原位移植瘤模型的建立
2017年05月16日
来源:中国比较医学杂志 2017年第04期
作者:李旺 黄焱 田新华 李良成 穆军博 童俊江
责任编辑:admin
摘要:本研究选取常用的人胶质瘤细胞U251,并采用GFP-luciferase基因标记后筛选出稳转细胞株,建立一种无创的、可实时监测的胶质瘤动物模型。
目的: 建立一种稳定、可实时监测的胶质瘤原位移植瘤裸鼠模型。
方法: 用带有荧光素酶(luciferase-Luc)和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein-GFP)基因的慢病毒感染U251神经胶质瘤细胞,流式细胞仪筛选稳定表达GFP-Luc荧光的细胞系,并通过CCK-8实验、细胞周期实验、Transwell肿瘤迁移及侵袭实验等评价荧光细胞的增殖、迁移和侵袭能力是否改变;将细胞接种至裸鼠大脑尾状核,建立胶质瘤原位移植瘤模型,利用小鼠活体成像系统监测脑内肿瘤的生长情况,并通过石蜡切片,HE染色评价细胞在裸鼠脑内的病理特征及成瘤能力。
结果: 成功构建稳定表达GFP荧光和luciferase荧光的U251胶质瘤细胞系及动物模型,慢病毒整合并未改变细胞的增殖、迁移及侵袭能力;模型生长周期适中,成瘤率高,瘤体在颅内生长稳定,HE切片符合人胶质瘤特征。
结论: 双荧光标记的胶质瘤细胞相比于传统细胞更有利于胶质瘤动物模型的实验研究;U251-GFP-Luc胶质瘤细胞裸鼠模型,其肿瘤生长和病理特性与人胶质瘤相似,且可实时观察肿瘤生长,可作为胶质瘤实验研究的理想动物模型。
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