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脂多糖干预对大鼠周围神经损伤后瓦勒变性的影响

2017年05月11日 浏览量: 评论(0) 来源:中国实验动物学报 2017年第2期 作者:熊乐 张倩 沈若武 边洪琳 孙广强 王毅 张凤玉 张蓓 责任编辑:admin
摘要:在外周神经损伤大鼠模型中,通过在大鼠神经断端单次显微注射微量LPS,探究LPS对瓦勒变性中炎性细胞募集及髓鞘碎片清除的影响,旨在从分子免疫学角度,在损伤早期缩短瓦勒变性时间,提高神经修复速度及质量,为周围神经辅助治疗提供新思路。

目的 探讨脂多糖对于大鼠坐骨神经损伤瓦勒变性早期髓鞘碎片清除的影响。 

方法 将50只Wistar大鼠随机分成假手术组(10只),模型组(20只)和脂多糖LPS组(20只),LPS组及模型组横断大鼠右侧坐骨神经后,行神经外膜端端吻合;假手术组仅游离出坐骨神经,然后关闭切口。LPS组大鼠在神经断端显微注射LPS (2 g/ L) 1 μL,模型组及假手术组大鼠注射同等体积生理盐水。于术后1.5、24 h和7 d 取术侧坐骨神经。实时定量PCR(qRT-PCR)检测坐骨神经中白介素1β(IL-1β)mRNA、单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1) mRNA水平;免疫荧光法检测坐骨神经中CD68+巨噬细胞的表达;HE染色观察坐骨神经的病理变化;油红O染色观察坐骨神经脱髓鞘程度;LFB染色观察坐骨神经髓鞘变化;坐骨神经功能指数(SFI)评价大鼠运动功能的恢复情况。

结果 实时定量PCR显示,与假手术组相比,术后1.5 h模型组IL-1β mRNA和MCP-1 mRNA的表达均明显升高(P < 0.001,P < 0.001),与模型组相比,术后1.5 h LPS组IL-1β mRNA和MCP-1mRNA的表达明显升高(P < 0.001,P < 0.001)。术后24 h模型组IL-1β mRNA和MCP-1m RNA的表达均明显升高(P < 0.001,P < 0.001),与模型组相比,术后24 h LPS组IL-1β mRNA和MCP-1 mRNA的表达明显升高(P < 0.01,P < 0.01)。免疫荧光可见,与模型组相比,术后7 d LPS组中CD68+细胞表达显著上调(P < 0.05)。术后7 d坐骨神经HE染色可见,LPS组坐骨神经断端较多炎性细胞浸润,许旺细胞增殖活跃,模型组神经断端炎性细胞和许旺细胞较少。术后7 d坐骨神经ORO染色可见,与模型组相比,LPS组断端远侧脱髓鞘程度较高。术后7 d坐骨神经LFB染色可见,模型组和LPS组坐骨神经断端均出现脱髓鞘反应,但与模型组相比,LPS组神经断端残余髓鞘碎片明显减少(P < 0.05)。SFI显示,与模型组相比,LPS组大鼠在术后10、20、30、40和50 d分别不同程度升高,术后20 d明显增高,差异有显著性( P < 0.05)。

结论 脂多糖通过激活固有免疫系统加快大鼠坐骨周围神经损伤后瓦勒变性早期髓鞘碎片的清除。

 

全文阅读:脂多糖干预对大鼠周围神经损伤后瓦勒变性的影响

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