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模型制备

带血管胸腺移植动物模型

2017年07月13日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 作者:周光兴 责任编辑:yjcadmin

(1)复制方法  供体组大鼠体重150~180g,受体组大鼠体重220~250g,按40mg/kg体重的剂量经腹腔注射戊巴比妥钠麻醉,麻醉后动物仰卧固定于手术板上,常规消毒腹部手术区域并去毛。供体大鼠手术:作肋弓下1.0cm横行切口人腹,经门静脉内注入肝素钠250U。切开膈肌,沿胸廓两侧向上翻起。游离升主动脉至降主动脉并分离主动脉弓上3条分支,结扎两侧颈总动脉及弓下血管分支,在两侧锁骨下动脉分叉点处结扎切断。于主动脉瓣远端结扎升主动脉,向远端灌注乳酸林格氏液10ml,切断升主动脉近端及降主动脉远端,于右房远端切断前腔静脉,并于无名静脉分叉处切断无名静脉,将胸腺连同主动脉、两侧锁骨下动脉、前腔静脉、无名静脉及其与胸腺之间的结缔组织整块切取,放入4℃乳酸林格氏液中修整,结扎升主动脉端及两侧无名静脉远端,建立完整的血运通路。受体大鼠手术:作右颈前区纵行切口,游离暴露右颈外静脉和右颈总动脉,以血管夹夹闭两条血管近心端,远心端在血管分叉处结扎切断。将游离血管穿入自制套管中,并将断端外翻套在套管外,结扎固定。将修整完毕的供体降主动脉和前腔静脉分别套在受体右颈总动脉和右颈外静脉套管外,排气后放开血管夹,结扎固定,如有分支血管出血,应逐一结扎,固定移植物。术后连续7d,按10mg/kg体重剂量静脉注射环孢素A以防感染。

(2)模型特点  采用本方法复制的带血管胸腺移植模型动物存活率高,供体胸腺切取经灌洗后变为乳白色,重新接通血管后胸腺变为粉红色,重建动脉搏动良好,胸腺无肿胀。术后4周取模型大鼠胸腺标本时移植胸腺无明显缩小,光镜下胸腺组织切片观察见胸腺组织结构基本正常,未见明显排斥现象。本模型以主动脉作为移植胸腺的供血血管,在进行动、静脉吻合时,采用了套管技术,大大缩短了血管吻合时间和温缺血时间,对受体动物打击小,同时也明显降低了手术操作难度。因此,本方法复制的带血管胸腺移植大鼠模型与以往胸腺移植模型相比,具有动物成活率高,操作简便,排斥反应小等优点。

(3)比较医学  到目前为止,带血管胸腺移植手术已用于恶性肿瘤以及重症肌无力患者的临床治疗。为获得令人满意的治疗效果,进一步拓展带血管胸腺移植手术的治疗范围,选择和建立合适的带血管胸腺移植动物模型非常重要。近年来,带血管胸腺移植动物模型在国内外均有研究报道,这些研究主要应用大鼠、小鼠、小型猪等进行了带血管的胸腺移植,但是移植物均采用胸腺的一个叶,胸腺功能未能得到充分发挥。与以往单叶胸腺移植动物模型相比,本方法建立的带血管胸腺移植动物模型采用的移植物为整体胸腺,它有利于最大限度地发挥移植胸腺的功能,是胸腺移植较为理想的动物模型。

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