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模型制备

缺血再灌注肝损伤动物模型

2017年07月17日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 作者:周光兴 责任编辑:yjcadmin

(1)复制方法  体重18~22g的雄性KM种小鼠,按30mg/kg体重的剂量经腹腔注射戊巴比妥钠麻醉,麻醉后将动物仰卧位固定于手术板上,腹部手术区常规消毒和去毛;沿腹正中线切开,暴露腹腔后分离肠系膜上动脉,用无损伤动脉夹夹闭其根部导致缺血,控制缺血时间为20min;然后放开动脉夹恢复血流通畅,进行再灌流时间为1h,1h后取小鼠血(制备血清)并处死,动物尸解后取肝脏作常规病理组织切片。

(2)模型特点  采用本方法制作的小鼠肠系膜上动脉缺血再灌注肝损伤模型,模型动物缺血时其体内超氧化物歧化酶(SOD)活性降低,肝脏丙二醛(MDA)含量呈增加趋势,且超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的体内变化随缺血时间递增;肠系膜上动脉缺血20min和再灌注1h时,小鼠血清丙氨酸转氨酶(alanine transaminase, ALT)和谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase, GST)活性可明显升高。镜下观察模型动物肝组织内肝小叶结构仍可见,但肝细胞呈水样变性,胞质疏松呈空泡状;部分肝细胞胞核浓染,已发生固缩、体积变小;肝组织内可见小灶性坏死,坏死灶内肝细胞结构已消失呈空网状,仅可见残留的细胞碎片及以中性粒细胞为主的炎症细胞浸润。

(3)比较医学  缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury)是临床上外科常见的组织器官损伤,在严重感染、创伤、休克、心肺功能不全等疾病的病理演变过程中起重要作用。机体出现缺血再灌注损伤的发病机制,目前主要认为,与缺血时体内可生成大量氧自由基,而导致与缺血有联系的组织器官脂质过氧化有关。由于机体内肝脏和肠道血管分布的特点,机体肠缺血再灌注可引起肝损伤,甚至可引发多系统器官功能不全综合征。本方法复制的小鼠缺血再灌注肝损伤模型,模型制作过程中应注意小鼠的保温保湿,关闭腹腔后腹部要覆盖纱布,并适时地往纱布上补充生理盐水。本模型可模拟临床上患者的缺血再灌注肝损伤,对探讨缺血再灌注损伤的发病机制及药物干预具有一定的实用价值。

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