背景：刺梨被用来治疗炎症、发热、消化不良、支气管炎、痔疮、蛇咬伤及神经系统疾病。在本研究中我们的目的是探讨刺梨根提取物的镇痛效果及毒性。

方法：刺梨生根粉使用甲醇提取（VRM），所得产物分馏成石油醚（VRP），氯仿（VRC），乙酸乙酯（VRE）和残留水溶性组分（VRA）。采用小鼠模型使用醋酸扭体法、福尔马林注射法和热板试验研究提取物的镇痛作用。采用体外培养的对虾致死性生物测定法评价植物提取物的细胞毒活性。

结果：在醋酸扭体试验，不同剂量组的小鼠（12.5，25，和50毫克/公斤，腹腔注射）明显减少小鼠扭体次数。其中，VRE在所有三个浓度（43.65，71.34，和80.23%）活性最高呈剂量依赖性。福尔马林注射法测试的第一阶段（15，37.05和56.44%）以及测试的第二阶段（20.55，49.08和59.81%），VRC（12.5，25，和50毫克/公斤，腹腔注射）显示小鼠舔足时间减少最多。在热板试验研究中，25和50毫克/公斤剂量VRE给药30min后，增加动物到出现添足反应之间的时间。与盐水中的标准药物硫酸长春新碱相比，所有的组分都具有较低的细胞毒性。

结论：研究表明，刺梨根作为低毒性强效镇痛药是有效的。

关键词：镇痛  刺梨  福尔马林  细胞毒性  疼痛

背景：疼痛是一种与实际或潜在的组织损伤有关的不愉快的感觉和情绪体验。病理过程如肿瘤、肌肉痉挛、炎症、神经损伤或有毒化学、机械或热刺激的暴露可能是造成这种损伤的原因。另一方面，慢性疼痛与背部损伤、偏头痛、关节炎、带状疱疹、糖尿病神经病变、颞下颌关节综合征和癌症有关。一般有两组镇痛药用于治疗疼痛，甾体和非甾体类药物。抗发炎药物非甾体类药物（NSAIDs）是建议治疗轻度到中度痛苦，而甾体类（阿片类）是最早使用的止痛药，主要用于缓解剧烈急性和严重的慢性疼痛，通常是术后和癌症相关的疼痛。由于非甾体抗炎药引起的胃粘膜病变等不良反应，及阿片类药物引起的耐受性和依赖性限制他们的使用。寻找缺乏副作用的新药获得一种新的具有改善药理特性的药物，有助于扩大治疗的范围、有效性和安全性。许多植物源性药物从很久之前就被使用，没有任何不良反应。植物代表了大量有用化合物的天然来源，这些化合物可能是新药开发的先导。虽然诉刺梨根具有广泛的药用治疗疼痛和炎症，到目前为止，还没有研究研究它的镇痛效果。因此，本研究的目的是探讨刺梨根镇痛活性。

方法：植物提取物：收集干燥的刺梨根（500g），使用甲醇冷萃取法提取。然后在50°C温度下用旋转蒸发器过滤提取浓缩液，得到粗甲醇提取物（12.5 g）。浓缩甲醇提取物一部分（10克）溶解在水中，并进一步分为四个不同的抽提物。石油醚(2.05 g)、 氯仿（3.68克）、乙酸乙酯（1.67克）和残留水溶性组分（2.6克）。

动物：瑞士白化小鼠（雌雄）重约30-35克被用于这个实验。动物饲养在标准实验室条件（25°C和12/12小时光/暗周期），提供标准实验室饲料和饮水。

体内实验：镇痛活性

醋酸扭体试验：雌雄小鼠（n = 5,重达30-35克）分别分为17组。I组注射生理盐水（10毫升/公斤）为对照，第二组接受标准药物双氯芬酸钠（10毫克/千克），其余组五种提取物各浓度12.5、25、50 mg/kg分别腹腔注射。注射生理盐水，双氯芬酸钠，植物提取物后30分钟，用腹腔注射1%（v/v）醋酸。醋酸注射5分钟后记录10min之内的动物腹部收缩数目，并同对照组动物反应相比较。镇痛活性被计算为扭体抑制百分率。

福尔马林试验：用0.9%盐水配制成20ul 2.5%福尔马林，注入小鼠右后肢足底区。福尔马林注射前60分钟，动物用赋形剂（0.1 ml/kg生理盐水）、硫酸吗啡和双氯芬酸钠（10mg/kg），与不同剂量分数（12.5，25，和50 mg / kg）的植物提取物进行腹腔注射。把测量舔和咬注射爪的时间（秒）作为疼痛反应的指标。福尔马林注射后测量5 min反应（第一阶段）和15-30分钟反应（第二阶段），分别对应神经源性和炎症性疼痛反应。镇痛活性被计算为抑制舔时间百分比。

热板试验：热板试验被用来测量中枢镇痛活性。雌性小鼠随机分为十二组，每组六只。小鼠被放置在预先选定的热板上（55±0.1°C）。舔或抓后爪被作为观察参照参数。动物表现出反应时间（定义为舔或用后爪或跳跃潜伏期）大于20S的被丢弃。然后动物给予赋形剂（生理盐水，0.1毫升/ 10 g，腹腔注射），硫酸吗啡（10毫克/公斤，腹腔注射），和五个组分植物提取物（25和50 mg/kg，i.p.）。用药后30, 60, 90分钟和120分钟，确定小鼠在热板上的反应时间，最大为20s。

体外实验：细胞毒性试验：盐水虾的卵在人工海水中孵化（海盐38 g/L，调节pH至8.5，用1 N NaOH）提供恒定曝气48 h，把虾幼虫称为无节幼体。每种提取液分别用DMSO（不超过0.01%）分别溶解在5毫升人工海水中，并获得50, 100, 200、300和400μml的浓度。在每个测试管中放入10个无节幼体。以标准硫酸长春新碱为阳性对照，浓度分别为0.312、0.625、1.25、2.5、5μg／ml。对照管含海水二甲基亚砜（与试验样品试管DMSO浓度相同）。在25-30°C经过24小时的潜伏期、使用放大镜计数活的无节幼体。计算半数致死浓度（LC50）。

结果：镇痛活性

醋酸扭体试验：减少醋酸引起的扭体反应引起的疼痛感是评价外周镇痛药的显著方法之一。在瑞士白化小鼠刺梨甲醇提取物的抑制扭体百分率见图。该提取物的（12.5，25，和50毫克/公斤）镇痛作用呈浓度依赖性。VRM在浓度12.5，25，和50毫克/公斤时被发现减少扭体分别为6.80，15.97，和25.81%。双氯芬酸钠（10 mg/kg）作为对照品可使扭体运动减少75.74%。VRM提取物组分石油醚、氯仿、乙酸乙酯、水依次进行同样的测试。VRE在50毫克/公斤时获得最高活性抑制率80.23%。其次是VRC，VRP，和VRA的64.62，56.74，和21.72%的抑制作用。低剂量12.5毫克/公斤的VRM，VRP，VRC，VRE，和VRA分别具有6.80，27.44，43.63，28.38和5.63%的抑制率。研究结果表明，刺梨具有明显的外周镇痛活性。

福尔马林：双相福尔马林模型分别显示以神经源性和炎症性疼痛为代表的镇痛药的作用部位和作用机制。所有的试验提取物都显著地减少了两个阶段的舔爪时间，但浓度依赖性在后期减少最显著。舔足时间抑制VRC两相的比例表明，它具有潜在的抑制活性。该提取物50毫克/千克在第一和第二阶段分别减少56.44和59.81%的舔爪时间，双氯芬酸钠对照品仅在剂量10 mg/kg时第二阶段有效，抑制率为70.29%。吗啡在早期和晚期分别减少了舔爪时间47.33和70.74%。VRP和VRE也提供了较高的抑制活性，降低早期阶段舔足时间44.59和43.57%。与双氯芬酸钠相比，在50毫克/千克的后期阶段，分别降低添爪时间42.44和50.94%。

热板试验：给药30min 后，所有组分在剂量25和50毫克/公斤时均增加潜伏时间。给药30min 后，剂量为50 mg/kg其作用呈剂量依赖关系，其中乙酸乙酯和氯仿提取物的效果最好（分别为58.43和52.34%）。给药30, 60, 90，和120分钟后，吗啡的抑制百分比（10 mg/kg）显著增高分别为63.77，69.49，62.37，和59.58%。

体外细胞毒性试验：化合物的毒性谱是其安全使用的一个重要指标，因为它能够改变细胞的生化功能，最终导致细胞死亡。盐水虾杀伤力试验用于检查所有测试样品的细胞毒性作用。无节幼体死亡率的百分比表示为杀伤力试验结果。VRC具有最低的LC50值（75.79μg/ml），而VRA提供最高的LC50值（502.42μg/ml）. VRM，分别VRP和VRE的LC50值分为153.72，223.01，和343.64μg/ml。结果表明，所有试验样品的LC50值，与标准硫酸长春新碱相比（LC50=0.89μg/ml）低于毒性临界值。

结论：刺梨根是具有较低毒性的镇痛药物。其是一种限制疼痛的有效候选药物。此外，还需要进行大量的研究来阐明这些效应的确切成分和精确机制。