摘要：桃金娘属已在世界的不同地区用于治疗腹泻和痢疾。然而，叶提取物的安全性和有效性还没有得到动物模型的科学验证。本研究旨在用小鼠调查，80%的桃金娘属植物甲醇提取物（80Me）和叶片溶剂组分的止泻作用。

方法：80%的桃金娘属植物甲醇提取物（80Me）和叶片溶剂组分对蓖麻油引起的腹泻模型的止泻作用、木炭粉试验和肠液累积试验。80%Me，试验组有100, 200和400毫克/公斤的提取物。叶片溶剂组试验组各剂量组（200, 300, 400毫克/千克和800毫克/公斤的水溶性部分追加剂量（AF）），而阴性对照使用赋形剂（10毫升/公斤）和阳性对照组给予洛哌丁胺（3毫克/公斤）。

结果：在200毫克/公斤的80Me和400毫克/千克以及氯仿（CF）和400毫克/公斤甲醇馏分（MF）在明显延迟腹泻开始时间。此外， 80Me（所有测试剂量）和两个浓度（300和400毫克/公斤）显著降低的排便频率和粪便量。木炭粉试验显示80Me所有剂量以及300毫克/公斤和400毫克/千克的CF和MF能产生显著的抗运动影响。肠液累积实验，80Me以及CF和MF（300和400毫克/公斤）产生的肠内容物重量和体积显著下降。

结论：研究表明，80Me和溶剂组分中含有生物活性成分，有止泻作用。本文的研究为治疗腹泻病的桃金娘科提取物的应用提供了科学的依据。

关键词：桃金娘属   蓖麻油  止泻功效  80%Me  溶剂组分

方法：化学试剂：萃取过程所用的溶剂均为实验室级。研究中使用的药物和化学品包括：蓖麻油、活性炭，洛哌丁胺，蒸馏水，吐温80、氯仿，无水甲醇、冰醋酸、硫酸，氨，盐酸、乙酸酐、氯化铁。

植物材料：叶子轻轻地冲洗，在室温下在阴凉处晒干2周。然后用研钵和杵将干燥的叶子研磨到合适的大小。

实验动物：实验对象为体重为20～30克、6～8周之间的瑞士白化小鼠。室温条件下饲养在塑料笼子里，在12 h/12h光/暗周期, 自由采食和饮水。小鼠适应实验室条件1周。在所有实验开始前18小时开始禁食。除了肠液累积实验可获得饮水外，其他实验都禁食禁水。

植物材料提取：制备80Me: 用数字天平称量干粉五十克。500毫升的80Me溶剂倒在一个锥形瓶。植物材料浸泡72 h，使用120rpm的微型轨道振动筛偶尔摇晃。提取液通过双层棉布过滤。然后未过滤出的物质添加另一个新鲜溶剂重新浸润第二和第三次。所得的滤液合并，在40°C用旋转蒸发器减压状态下浓缩滤液。获取深绿色的糊状物放入冰箱中固化。用冻干机去除剩余的水溶剂。80Me产量的比例则为16.33%（w/w）。最后，用密闭容器将提取物置于深冻状态，直至实验结束。

溶剂组分的制备：萃取和浸渍技术用于植物材料的提取。初始程序类似的，80Me。用研钵和杵将干树叶被粉碎成粗粉，然后过筛，保持颗粒大小均匀。以极性溶剂为溶剂，连续索氏提取150克干粉。最后用蒸馏水甲醇浸渍。在每个批次中，将50克粉末状植物材料加入到提取顶针中，然后将其放入索氏仪的腔室中。Soxhlet固定装置的底烧瓶中加入350毫升氯仿。热应用室内虹吸进入溶剂透明液体。然后用抽吸过滤器对CF进行过滤。，在40°C的减压下用旋转蒸发器浓缩，然后在室温下用烘箱干燥48小时。收集顶针的榨渣，然后在室温下晾干，以除去氯仿。干燥的榨渣用甲醇重新提取。此外，MF的榨渣在室温下收集和干燥过夜。干燥后，测定了各组分的产率， CF、MF和AF分别为5.2、13.8和7.2%。这些馏分用密闭容器保存在低温冰箱中直到使用。

口服急性毒性试验：雌性小鼠在禁食3 h后和单剂量灌胃2000毫克/公斤的80Me。然后在最初的24小时内观察有无任何毒性迹象。根据第一只小鼠的结果，另外4只雌性小鼠被采用并禁食3小时。他们接受同样剂量的给药，观察在未来14天内是否有任何毒性或死亡迹象。

分组及给药：小鼠随机分为五组，每组各六只用于80Me和溶剂组给药。各组均采用口服灌胃给药。第一组作为阴性对照，接收赋形剂（蒸馏水，10毫升/公斤）。第二组作为阳性对照和接受标准药物洛哌丁胺（3毫克/公斤）。，根据急性毒性试验确定80Me试验组剂量水平，以100 mg/kg，200毫克/千克和400毫克/公斤80Me给药。溶剂组分试验组的剂量是根据一系列的试验研究确定的，不同剂量的组分（200毫克/千克、300毫克/千克和400毫克/千克和800毫克/千克的AF）给药80Me和溶剂组都用赋形剂蒸馏水配制不同的浓度，并在实验当天制备。

止泻活性测定：蓖麻油（CO）诱发腹泻：瑞士白化小鼠禁食18小时，随机分为五组，每组六只动物，按UMer等人描述的方法诱导腹泻。给药后1小时，所有动物接受0.5毫升的CO。此后，他们被单独放在笼子里，地板上铺着白纸。在4小时的观察期内，记录个别小鼠的腹泻发生率、排便频率和粪便输出量（湿和总粪便）。根据公式1-3确定腹泻的抑制和粪便输出量的百分比。

CO诱导胃肠动力：所有小鼠禁食18小时，分为五组，每组六只。一小时后，给予0.5毫升CO。口服CO 1小时后，给予1ml的标记物（5%活性炭悬浮在蒸馏水中）。动物在一小时后处死，从幽门到盲肠被解剖。测量从幽门中取出木炭的距离，并用公式4中所示的从幽门到盲肠（蠕动指数）小肠总长度的百分比来表示。然后用公式5表示抑制百分率。

CO诱导的肠液累积：腔内液体积累采用Islam等人描述的方法。任何一种性别的小鼠都被禁食和禁水18小时，并在口服0.5ml的CO一小时前分组。给药1小时后，处死小鼠。每只小鼠的腹部被打开；小肠从幽门括约肌回肠盲肠交界处；两端结扎，仔细解剖。每条小肠称重，然后将其收集到刻度管中，从而测量小肠内容物的体积。每条小肠重新称重，计算全肠与空肠管的差异。最后，根据公式6和7分别测定肠内容物体积和重量的百分比抑制率。

MWICC=对照组的肠内容物平均体重；MWICT=试验组的肠内容物平均体重的。

体内抗腹泻指数: 体内抗腹泻指数(ADI)由下列公式确定： 

Dfreq=延迟排便时间或腹泻发病GMeq=肠内容物移动减少Pfreq=湿泄次数减少。

植物化学成分的初步筛选：80Me和溶剂组分含有生物碱、黄酮类化合物的存在，丹宁酸、萜类、甾类、苷类、皂苷。

结果：口服急性毒性试验：单剂量口服2000毫克/公斤时，14天观察期内80Me没有产生明显毒性或动物死亡。高达5倍的最大有效剂量，没有出现死亡率和明显毒性的迹象提示80Me具有更大的安全边际和小鼠LD50值大于2000毫克/公斤。

对蓖麻油引起的腹泻模型的影响：

CO诱导的腹泻模型，同对照组相比，在200毫克/千克和400毫克/公斤剂量时80Me显著延长腹泻的发病的频率和减少粪便排泄量。100毫克/千克时，显示出对湿粪的排出频率、粪便重量和总排泄量有显著影响。在100毫克/公斤的剂量，200毫克/千克，400毫克/千克腹泻的抑制率分别为42.58%、62.52%，和74.96%。

溶剂组分，CF和MF在400毫克/公斤时对腹泻开始产生显著的延迟。CF在300毫克/千克和400毫克/千克时，腹泻的抑制率分别为51.23%和58.92%。CF在300毫克/公和400毫克/公斤斤也显示出潮湿和粪便总重量显著降低。MF在300毫克/公斤和400毫克/公斤时明显降低排泄频率和湿粪便重量。在400毫克/公斤获得最高腹泻抑制率（62.67%）。与对照组相比，AF在所有试验剂量下都没有明显的腹泻延迟。

对蓖麻油诱导小鼠肠道转运的影响：所有剂量的80Me显著抑制炭粉肠道转运。在剂量为100毫克/公斤，200毫克/千克和400毫克/千克时，发现胃肠炭粉传输率减少分别为33.54%、46.12%和62.31%。该提取物的最大剂量具有与标准品相当的抗运动效果。与对照组相比，CF和MF剂量为300毫克/千克和400毫克/公斤时也显著抑制木炭粉的肠道转运。AF在800毫克/公斤表现出显著的抗运动效果。

对肠液累积的影响：80Me所有测试剂量与对照组比较显示出平均体积和肠内容物重量显著减少。在剂量为100毫克/公斤，200毫克/千克，400毫克/公斤对肠内容物体积的抑制率分别为25.58%、38.37%和46.51%。CF和MF在剂量300毫克/千克和400毫克/公斤时减少平均体积和肠内容物重量。

抗腹泻指数：最大的ADI为80Me 400毫克/公斤剂量（83.96%）。在溶剂组分中，MF在400毫克/千克剂量下表现出最高的ADI值（71.81%）。

结论：研究表明，桃金娘属叶片提取物80Me和溶剂部分有止泻的治疗功效。

https://link.springer.com/article/10.1186/s12906-017-1625-3