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模型制备

缺血再灌注肺损伤动物模型

2017年08月22日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 作者:周光兴 责任编辑:yjcadmin

(1)复制方法  应用年龄4~5周,体重为7~10kg的乳猪,雌雄不限。动物手术前禁食12h,经肌肉注射阿托品20mg/kg体重、氯胺酮15mg/kg体重以及静脉注射硫喷妥钠25mg/kg体重作诱导麻醉,动物仰卧固定于手术台上,然后作气管插管与呼吸机连接。控制呼吸,设定通气模式为 CMC,呼吸频率为20次/min,潮气量为15ml/kg体重,吸入氧浓度为40%;以硫喷妥钠和氯化琥珀胆碱交替维持全麻。切开左侧腹股沟,分离股动脉(监测血压)及股静脉(建立静脉通道维持麻醉及采取血标本)。经胸骨正中切口进胸,剪开并悬吊心包,暴露心脏。分别在左右心耳和肺动脉缝大小合适的荷包,肝素化(3mg/kg体重)后,以10F动脉插管插入主肺动脉,以两根16F静脉插管分别插入左右心耳。通过右心耳插管将自体血液引入一次性贮血滤血器400ml左右。贮血滤血器入血口端和出血口端的体外循环管道分别连接左心耳、肺动脉插管,经左心耳插管将肺静脉血引入贮血滤血器,再通过滚压式血泵将贮血滤血器中的血经肺动脉插管泵入肺动脉。当全身血液引入贮血滤血器后,停止肺部灌注90min,再通过血泵以80ml/kg体重的流量灌注30min,即可建立隔离肺缺血再灌注乳猪模型。

(2)模型特点  本模型建立后动物的肺静止顺序性降低,肺湿干比增加,病理组织学观察证实,已出现明显的肺组织损伤。光镜下肺泡壁明显增厚,肺间质水肿,PMN浸润,毛细血管内微血栓形成,肺组织渗出增加。电镜下肺泡Ⅱ型上皮细胞明显肿胀,板层小体明显有脱颗粒现象,邻近的毛细血管可见淤血。本模型操作简便,通过体外循环建立的隔离肺缺血再灌注模型,较之国内外常用的结扎或钳夹肺动脉、气囊堵塞肺动脉以及经导管用异物封堵肺动脉等方法建立的肺缺血再灌注模型更容易控制,影响因素较少。

(3)比较医学  缺血再灌注肺损伤是指肺组织或其他组织器官遭受一定时间缺血后恢复血液灌注,肺组织损伤程度迅速增加的病理现象。临床上缺血再灌注肺损伤多见于肺栓塞溶栓治疗、肺血栓内膜切除术、心肺移植以及肢体手术、腹主动脉肿瘤手术等疾病的并发症。一般认为,在这些疾病手术治疗过程中,短暂的肺组织缺血再灌注可使肺血管的内皮细胞功能受损,中性粒细胞激活,氧自由基释放,血小板激活,最终引起肺组织受损,这种现象对相关疾病的治疗及预后影响较大。建立动物模型来研究缺血再灌注肺损伤是较为理想的方法之一。由于猪的心血管系统生理解剖与人极为相似,因此其比以往常用的大鼠、兔和犬更适合用于缺血再灌注肺损伤模型研究。

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