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模型制备

腹腔注射醋酸铅肾病模型

2017年08月31日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 作者:周光兴 责任编辑:yjcadmin

(1)复制方法  体重200g左右的雄性大鼠,经腹腔按5mg/kg体重的剂量注射0.5%醋酸铅,每周5次,共持续注射12周。12周后模型动物麻醉放血处死。造模前及模型制作过程中,分别测定包括尿蛋白定量,尿铅排泄量、肾铅及肾小球滤过率等肾功能指标,并在实验预定时间麻醉处死动物,取肾脏组织标本,置放于固定液中,作常规组织切片,HE染色,光镜下观察。同时取肾组织作电镜标本,透射电镜下观察。

(2)模型特点  注射醋酸铅2周后,模型大鼠体重开始下降,活动减少,体毛疏松不齐,至第3周时体重明显降低。造模后第3周时,动物尿蛋白含量开始出现增加,之后保持上升趋势,至12周时,尿蛋白含量可达到造模前的15倍;3周时尿铅排泄量即出现增高,并持续维持至12周;模型大鼠尿中r-谷胺酰转肽酶(r-GT)活性、尿δ-氨基-酮戊酸(δ- aminolevulinic acid,δ-ALA)含量、血锌原卟啉(zine protoporphyyin, ZPP)值均较造模前有显著升高。镜下病理组织学观察显示,6周时肾组织内可见肾小球毛细血管充血,肾近曲小管上皮细胞颗粒样变性及核内包涵体形成;至12周时近曲小管可见重度空泡样变性和灶性坏死,远曲小管也有轻度空泡样变性。电镜下超微结构观察可见,细胞核固缩,线粒体肿胀,嵴模糊不清。

(3)比较医学  临床上铅性肾损害导致的CRF是造成患者的主要死因之一。本方法建立的模型,除了应用肾功能及形态学指标评价以外,还采用了与铅中毒密切相关的特殊指标。由于尿δ-ALA是目前公认的反映铅接触及中毒诊断指标,可间接反映机体铅性肾损害的程度。尿r-GT主要存在于肾脏近曲小管细胞刷状缘中,当铅中毒损伤肾小管后,可造成近曲小管细胞刷状缘脱落,导致尿中r-GT活性增高。而血ZPP是铅对卟啉代谢影响所产生的血中代谢产物,它比反映铅毒性的其他指标更为敏感。本模型通过这些指标的动态观察,表明给动物持续注射醋酸铅,可导致模型动物肾脏出现结构及功能的损害,并发生类似于临床上人类铅中毒时,机体出现的功能、代谢及形态结构方面的病理改变。本模型可用于人类铅性肾病的发病机制及发展规律方面的研究。

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