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miR-143通过负向调控Bcl-2抑制食管癌细胞的增殖

2017年10月11日 浏览量: 评论(0) 来源:中国比较医学杂志 2017年第9期 作者:胡琛琛 张莉 责任编辑:admin
摘要:现研究已经显示miRNA的异常表达与肿瘤的发生发展密切相关。同时在食管癌组织及其正常组织中发现多种差异性表达的miRNA,miR-143就是其中的一种,且其在其它肿瘤中的作用机制已被深入探讨,但在食管癌的发生发展的具体作用机制尚未见报道。此外肿瘤细胞呈现无限增殖与凋亡抑制,并受凋亡相关蛋白调控,Bcl-2 就是其中的一种凋亡抑制蛋白,且有研究显示miR-143能通过下调Bcl-2表达抑制骨肉瘤细胞、宫颈癌细胞增殖,因而本研究推测miR-143是否也可以通过靶向调控Bcl-2进而影响食管癌细胞增殖,本研究将对此推测展开以下实验研究。

目的 探讨miR-143通过负向调控B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)抑制食管癌细胞的增殖。

方法 RT-PCR法检测食管癌细胞TE-1、EC109、EC9706、KYSE150、KYSE510、SEG-1及人正常食管上皮细胞HEEC中miR-143表达,使用脂质体LipofectamineTM 2000将miR-143 mimics和miR-143 NC转入EC9706细胞中,48 h后,RT-PCR法检测miR-143表达,CCK-8法检测细胞活力,EdU染色检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,RT-PCR及Western blot检测Bcl-2蛋白及mRNA的表达。

结果 miR-143在食管癌细胞TE-1,EC109,EC9706,KYSE150,KYSE510及SEG-1中的表达量[(1.36±0.13),(1.08±0.10),(0.89±0.09),(0.95±0.09),(1.32±0.14),(0.96±0.11)]显著低于miR-143在人正常食管上皮细胞HEEC(2.38±0.15)中的表达量(P< 0.01)。与miR-143 NC组比较,miR-143 mimics组miR-143表达量显著升高(P< 0.01),细胞活力下降(P< 0.01),细胞增殖能力降低(P< 0.01),细胞周期阻滞在G1期(P< 0.01),同时Bcl-2蛋白及mRNA表达量显著降低(P< 0.01)。

结论 miR-143过表达能通过下调Bcl-2表达抑制EC9706细胞增殖。

 

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