黄河裸裂尻鱼肌肉生长抑制素基因克隆及表达分析
摘要:肌肉生长抑制素 (myostatin, MSTN) 属于转化生长因子β(TGF-β)超家族中的一个成员, 是骨骼肌生长发育的负调控因子。该文以黄河裸裂尻鱼肌肉总RNA为模板, 采用RT-PCT、5'-RACE和3'-RACE法获得MSTN基因全长cDNA序列为2 180 bp, 包含长为1 128 bp的开放阅读框, 编码375个氨基酸。以肌肉总 DNA为模板, 通过PCR法进一步获得了MSTN基因的2个内含子序列, 分析表明,黄河裸裂尻鱼MSTN基因与其他脊椎动物具有相似的基因结构(包括3个外显子和2个内含子)。黄河裸裂尻鱼MSTN具有脊椎动物MSTN的共同序列特征, 含有1 个蛋白酶水解位点RXXR 和8个位于TGF-β功能区域保守的半胱氨酸残基。氨基酸序列同源性分析表明, 黄河裸裂尻鱼MSTN序列与其他鲤科鱼类MSTN具有较高的同源性;而与哺乳动物和禽类的MSTN同源性较低。系统发育分析表明, 黄河裸裂尻鱼MSTN与其他鲤科鱼类聚于同一进化支。RT-PCR 分析表明, 该基因在黄河裸裂尻鱼9个被检组织中均有表达, 但在心、肾、肠、精巢中表达量较高。 Real-Time PCR分析显示, MSTN基因在胚胎中的相对表达量,随胚胎发育阶段的不同而有所差异, 暗示 MSTN的功能可能并不局限在对肌肉生长发育的负调控作用, 可能还有其他功能。
关键词:黄河裸裂尻鱼 肌肉生长抑制素 基因克隆 表达
收稿日期 2012-05-21 修回日期 2012-09-04
通讯作者: 张辉, 祁得林
作者Email: delinqi@126.com; pzhyp@sina.com
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