犬前列腺增生模型
(1)复制方法 体重为10~13kg年龄为2~3岁的雄性Beagle犬,按10mg/kg体重的剂量速眠新Ⅱ0.1ml肌注麻醉后,将犬仰卧固定于手术台上,手术区阴囊皮肤常规消毒并去毛,用无菌手术切除其双侧睾丸。经1周自然恢复后,给模型犬肌肉注射1ml含5a-雄甾烷-3a、17β-二醇(25mg/ml),17β雌二醇(0.25mg/ml)的三酰甘油,3次/周,每周注射的总剂量为雄激素75mg,雌激素0.75mg;连续注射6个月。检测方法分别于模型动物给药2、4个月时,将模型动物麻醉固定后,无菌手术切开腹壁,直视下作前列腺穿刺活检并留取前列腺组织切片标本;同时用游标卡尺测量前列腺前后径、左右径以及上下径,计算前列腺近似体积。模型动物于给药6个月后,经麻醉放血处死,尸体解剖后取前列腺组织标本,称前列腺重量,并用水取代法测量前列腺体积。取模型动物前列腺组织经固定后,分别作常规病理组织切片及电镜标本,置光镜及透射电镜下观察。
(2)模型特点 本方法复制的模型其前列腺重量及体积可明显增加,镜下病理组织学观察显示,随着造模时间的推移,前列腺病理演变过程可分为三期。轻度增生期(1~2个月):前列腺上皮细胞多呈低柱或立方状,细胞内可见少许分泌物,胞核位于基底或中央;前列腺腺泡形态基本正常,基质病变较轻,前列腺表现为轻度增生。中度增生期(3~4个月):前列腺组织结构介于轻度与重度增生之间,腺上皮细胞呈柱状或高柱状,胞核圆并可见核仁,少数上皮细胞层数增加,腺体明显密集排列;部分腺上皮增生,呈乳头状向腔内突出,腺腔内可见粉染物质,分泌物增多,腺腔明显变小。重度增生期(5~6个月):前列腺明显呈结节状增生,腺腔扩大,腺上皮呈柱状复层或假复层,上皮细胞乳头状明显增生,腺腔内可见粉染物质。腺腔周围基质丰富,间质增宽并可见平滑肌增生。透射电镜下观察显示,2个月时前列腺腺上皮细胞呈高柱状,代谢旺盛,分泌颗粒增多,但是间质内胶原纤维增生不明显。4个月时腺上皮多为单层柱状上皮,但可见假复层柱状上皮,增生的腺上皮排列紧密,基膜完整连续但已有增厚,分泌颗粒进一步增多,胶原纤维增生,平滑肌肌丝增多,偶见腺上皮细胞破坏。6个月时模型动物前列腺超微结构显示,腺上皮呈假复层增生,胞核内常染色质丰富,异染色质少见,显示细胞功能旺盛,间质内充满胶原纤维,尚可见较多成纤维细胞,部分细胞已发生变性坏死。
(3)比较医学 哺乳动物中唯有人和犬能终生保持睾酮转变为双氢睾酮的能力,所以临床上中老年男性及老年雄性犬都可能会发生前列腺增生(prostatic hyperplasia, PH),因此老龄及雄激素是发生前列腺增生的必要条件,而机体内的雄激素水平又起主导作用。以往研究表明,雄性犬6岁后都可观察到镜下的PH,但是老年犬前列腺也有其特殊的病理变化,镜下常可见腺瘤样变、结石等结构,8岁后犬的前列腺重量可明显增加。因此,很多研究者常采用老年犬来进行前列腺增生(benign prostatic hyperplasia, BPH)基础和临床的动物实验研究。然而老年犬很难获得,个体差异也比较大。本方法采用提高动物机体的雄激素水平来达到复制犬前列腺增生的目的,造模方法简便,耗费低廉,实用性强,适用于前列腺增生发病机制及药物治疗方面的研究。