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水貂阿留申病毒、肠炎病毒与犬瘟热病毒多重PCR检测方法的建立与应用
2018年01月24日
来源:中国比较医学杂志 2017年第12期
作者:马芹 王元智 闫文卓 赵丽丽 陈洪岩 陆涛峰
责任编辑:admin
摘要:水貂阿留申病、病毒性肠炎与犬瘟热并称影响水貂健康的三大疫病,拟建立一种可同时检测三种病毒的多重PCR检测方法。
目的: 水貂阿留申病、病毒性肠炎与犬瘟热并称影响水貂健康的三大疫病,拟建立一种可同时检测三种病毒的多重PCR检测方法。
方法: 针对三种病毒基因保守区分别设计了3对特异性引物,对貂阿留申病毒(ADV)和水貂肠炎病毒(MEV)的DNA模板和犬瘟热病毒(CDV)的RNA模板进行了多重PCR扩增和扩增条件优化。
结果: PCR可同时扩增出601 bp (ADV)、205 bp (MEV)和451 bp (CDV)的特异性目的条带,敏感性试验表明最低核酸检出量为ADV每微升2.67×104拷贝、MEV每微升3.02×104拷贝和CDV每微升1.72×105拷贝。临床样品检测结果表明多重PCR和单一PCR检测结果一致。
结论: 建立的多重PCR检测方法可快速地检测ADV、MEV和CDV单一或混合感染的临床样品。
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