全长与成熟形式IL-37b的真核表达载体的构建与研究
2018年04月04日
来源:中国比较医学杂志 2018年第2期
作者:李梦媛 韦荣飞 杨星九 朱瑞敏 高苒
责任编辑:admin
摘要:构建全长与成熟形式IL-37b 的真核表达载体pEGFP N1/ IL-37b,检测二者在RAW 264.7 细胞中的表达情况。
目的: 构建全长与成熟形式IL-37b 的真核表达载体pEGFP N1/ IL-37b,检测二者在RAW 264.7 细胞中的表达情况。
方法: 以含IL-37b 全长编码区基因的质粒pUBC/ IL-37b 为模板,构建能够表达全长与成熟形式IL-37b 的真核表达载体?将构建的重组质粒pEGFP N1/ IL-37b 转染到RAW 264.7 细胞中,通过western blot 和共聚焦显微镜检测全长与成熟形式的IL-37b 的表达情况,并通过real-time PCR 检测全长与成熟形式IL-37b 对LPS 诱导的IL-6 表达的抑制作用。
结果: 构建的pEGFP N1/ IL-37b 转染后能够在细胞中表达全长与成熟形式的IL-37b,并且能够抑制LPS 诱导的IL-6 的表达。
结论: 成功构建了全长与成熟形式IL-37b 的真核表达载体,为进一步研究IL-37b 的炎症抑制作用与机制打好基础。
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