树鼩腺病毒Taqman实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用
2018年05月17日
来源：中国比较医学杂志 2018年第3期
作者：宋庆凯 李晓飞 苗雨润 张志成 王璇 袁圆 代解杰 孙晓梅
责任编辑：admin
摘要：通过建立树鼩腺病毒（ｔｒｅｅ ｓｈｒｅｗ ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ，ＴＡＶ）ＴａｑＭａｎ 实时荧光定量ＰＣＲ 检测方法，快速准确地检测树鼩腺病毒。
目的：通过建立树鼩腺病毒（ｔｒｅｅ ｓｈｒｅｗ ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ，ＴＡＶ）ＴａｑＭａｎ 实时荧光定量ＰＣＲ 检测方法，快速准确地检测树鼩腺病毒。
方法：根据ＴＡＶ 全基因组３’端保守序列设计合成特异性引物；用含目的基因片段的重组质粒作为标准品进行标准曲线绘制，建立ＴＡＶ ＴａｑＭａｎ 实时荧光定量ＰＣＲ 检测方法。
结果：建立的ＴＡＶ 实时荧光定量ＰＣＲ 检测方法特异性好，与树鼩源及其他物种常见病毒无交叉反应；方法的最低检测限度为每微升３.７ 拷贝，灵敏性强；相关检测系数Ｒ２ 为０.９９８，扩增效率为９５.７％；扩增结果具有良好的线性关系，且重复性检测效果好。
结论：成功建立了ＴＡＶ ＴａｑＭａｎ 实时荧光定量ＰＣＲ 检测方法，灵敏度高，重复性好，可用于ＴＡＶ 感染的早期快速检测。
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