摘要：目前的调查没有评估豆蔻粉补充高碳水化合物高脂（HCHF）饮食诱导肥胖大鼠的潜在益处。

 

方法：雄性Wistar大鼠（28只）分为四组，对照组、对照组+豆蔻组、HCHF组、HCHF+豆蔻四组。在实验室中制备高碳水化合物和高脂肪（HCHF）饮食。测定大鼠口服葡萄糖耐量试验、脏器湿重测定和氧化应激参数分析及肝标志酶如丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）活性。对所有组的动物也测定血脂谱。此外，也进行了组织学染色评估炎症细胞浸润和肝纤维化。

 

结果：与对照组相比，HCHF饮食喂养大鼠产生葡萄糖耐受性和腹腔脂肪沉积增加。补充豆蔻粉能显著改善HCHF饮食喂养大鼠的糖耐量，防止腹脂沉积。与对照组相比，HCHF饮食喂养大鼠也出现血脂异常、脂肪沉积增加和肝脏炎症。豆蔻粉饲喂显著抑制HCHF饮食喂养大鼠脂质参数的升高。组织学评估证实HCHF饮食可增加肝脏脂肪沉积和炎性细胞浸润。由豆蔻粉补充HCHF饮食喂养大鼠的肝脏脂肪沉积和炎性细胞浸润正常。HCHF+豆蔻粉膳食对大鼠血浆和肝组织脂质过氧化、抗氧化酶活性降低和晚期蛋白氧化产物水平显著升高均有促进作用。HCHF日粮饲喂大鼠还增加了血浆中ALT、AST和ALP酶活性，而在HCHF+豆蔻粉膳食使血浆中ALT、AST和ALP酶活性正常。豆蔻粉改善HCHF饮食喂养大鼠的肝脏纤维化。

 

结论：本研究提示，豆蔻粉对HCHF饮食喂养大鼠的血脂、氧化应激和肝脏损伤有一定的预防作用。

 

 

背景：通常，香料被用来增加食物的风味。但调味品也可以用作药物，可以增强机体的免疫系统，减少发生各种危及生命的疾病的机会。特别是调味品可以减少代谢综合征、肥胖、高血压、糖尿病和非酒精性脂肪肝病。豆蔻挥发油具有镇痛、抗炎、抗菌和解痉作用。此外，豆蔻果实可用于抵抗心脏疾病、肾和水泡结石、消化不良、虚弱、厌食、哮喘、支气管炎、口臭和胃肠疾病。豆蔻还具有抗氧化、抗高血压、胃保护、解痉、抗菌、抗血小板聚集和抗癌作用。本研究旨在评估豆蔻粉补充高碳水化合物高脂（HCHF）饮食诱导肥胖大鼠的潜在益处。

 

方法：动物：28只Wistar雄性大鼠（10～12周龄，185～200 g）。为研究高碳水化合物高脂饮食的影响及补充豆蔻粉对其消减作用的研究，将动物随机分为四个实验组，每组7只。

对照组（Ⅰ组），正常水和日粮（粉碎为粉末）8周。

对照+豆蔻（II组），用豆蔻粉，正常水和日粮（粉末粉碎）8周。

HCHF（III组），HCHF饲喂8周。

HCHF+豆蔻（IV组），含1%豆蔻的HCHF饲料。

在我们的实验室中制备HCHF膳食颗粒形式（表1）。为评价HCHF喂养前后血糖活性，对四组治疗前后进行OGTT。每天记录体重、食物和饮水摄入量。56天后，用大剂量戊巴比妥麻醉（90 mg/kg）腹腔注射，对所有动物称重并处死。将血液从腹主动脉收集并置于4°C的肝素化管内。将血液样品在30分钟内4°C，8000转，离心15分钟，分离血浆。将分离的血浆转移到EP管，并储存在-20°C进行进一步分析。所有其他内脏器官如脂肪组织、心脏、肾脏、脾脏和肝脏也立即从安乐死动物中收集。

 

口服葡萄糖耐量试验：在喂养方案结束时，禁食（12小时），进行口服葡萄糖耐量试验。在食物剥夺期间提供正常的水。用葡萄糖计测定尾静脉取血的基础血糖浓度。2g/kg的葡萄糖进行灌胃口服。葡萄糖给药后30, 60, 90和120分钟取尾静脉血。

 

血浆生化：使用诊断试剂盒测定血浆总胆固醇、甘油三酯、LDL、HDL和血浆丙氨酸转氨酶（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）和碱性磷酸酶（ALP）的活性，血浆胰岛素。

 

组织标本的制备及氧化应激标志物的测定：为了测定氧化应激标志物，在10倍体积的磷酸盐缓冲液（pH 7.4）中匀浆化肝脏， 4°C ，8000转离心1 5分钟。收集上清液并用于测定蛋白质和酶。

 

过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和还原型谷胱甘肽（GSH）活性测定：在1分钟后测定反应溶液在240 nm处的吸光度变化。一个单位的CAT活性被定义为吸光度变化为0.01单位/分钟。用前述方法测定血浆和组织匀浆中的SOD。480nm处，15s的间隔，连续记录1min。

 

组织病理学测定：显微镜下，肝组织用中性缓冲福尔马林固定，石蜡包埋，切片5μm，HE染色，观察肝组织结构和炎性细胞浸润。肝切片中也进行了天狼星红染色染色和普鲁士蓝染色铁沉积。

 

结果：对体重、食物和饮水的影响：实验期间每天观察各组大鼠的体重、摄食量和饮水量。与对照组相比，HCHF大鼠体重显著增加。与HCHF饲喂大鼠相比添加豆蔻粉，体重下降，但变化不显著。四组动物之间也没有观察到食物和水分摄入的显著差异。

 

豆蔻粉对口服葡萄糖耐量试验（OGTT）的影响：研究开始时，各组均没有显著差异。在正常对照大鼠，葡萄糖负荷后60分钟观察到最大血糖升高，并在120分钟下降至接近基础水平。而在HCHF诱导的肥胖大鼠中，即使在60分钟后也观察到血糖水平的峰值升高，并且在接下来的60分钟内保持较高的水平。补充大豆蔻粉能显著降低肥胖大鼠的血糖水平，与HCHF饮食喂养的大鼠相比，在60分钟和更长的时间内血糖水平显著降低。在研究开始时OGTT的AUC在研究组之间没有表现出任何变化。

 

对器官湿重的影响：与对照组比较，HCHF日粮饲喂的大鼠肝脏湿重无明显变化。补充豆蔻粉（1% W/W日粮）可显著降低HCHF日粮中大鼠肝脏湿重。与对照组相比，HCHF饮食喂养大鼠的心脏和胰腺湿重也没有变化。

 

豆蔻粉对脂肪积累的影响：从脂肪组织中观察脂肪垫沉积水平的显著差异。与对照组相比，HCHF喂养组腹膜、脂肪垫湿重显著增加。补充豆蔻粉可显著降低腹膜脂肪垫湿重。HCHF膳食或豆蔻粉补充对研究组肠系膜和附睾脂肪沉积无影响。

 

豆蔻粉对胆固醇和甘油三酯水平的影响：与对照组相比，HCHF饮食喂养大鼠胆固醇和甘油三酯浓度显著升高。豆蔻粉补充HCHF饮食喂养大鼠显著降低胆固醇和甘油三酯浓度。

 

血清ALT、AST和ALP活性：与对照组相比，HCHF日粮饲喂大鼠显著增加肝脏标志酶如ALP、ALT和AST活性。添加豆蔻粉（1%豆蔻粉）可显著降低ALP、ALT和AST酶活性，改善肝功能。

 

血浆和肝脏氧化应激指标的评价：通过测量丙二醛（MDA）的形成来评价脂质过氧化。与对照组相比，HCHF组大鼠血浆和肝脏MDA含量显著升高。相反，豆蔻+HCHF饮食喂养大鼠显著降低血浆和肝脏MDA含量。与对照组相比，HCHF饮食喂养大鼠的高级蛋白氧化产物（APOP）也增加。豆蔻素能显著降低大鼠血浆和肝脏中APOP的含量。

 

抗氧化酶与谷胱甘肽状态：过氧化氢酶、SOD和GSH均是细胞抗氧化剂，减少氧化应激。与对照组相比，HCHF饮食喂养大鼠过氧化氢酶活性显著降低，而添加豆蔻的饲料鞥年增加过氧化氢酶活性。豆蔻能显著提高SOD的水平，改善血浆和肝脏的状态。与对照组相比，HCHF饮食喂养大鼠肝脏和血浆谷胱甘肽（GSH）浓度也降低。豆蔻显著升高大鼠肝脏GSH水平。

 

豆蔻粉+HCHF饮食对大鼠肝脏炎性细胞浸润和纤维化的影响：对照组和豆蔻对照组饲喂大鼠肝脏的HE染色结果显示肝细胞结构正常。HCHF日粮饲喂大鼠肝脏呈明显空泡变性，提示肝脏脂肪蓄积。与对照组相比，HCHF饮食喂养的大鼠也表现出更大的炎症细胞浸润，以及肝脏间质胶原沉积的增加。豆蔻补充（1%的粉饲料）显著减少HCHF饮食喂养大鼠的炎症和胶原沉积，而对照组大豆蔻补充与对照组相比没有显示任何变化。豆蔻进一步改善HCHF饲喂大鼠肝切片中游离铁沉积。

 

结论：豆蔻粉降低HCHF饮食诱导肥胖大鼠的总胆固醇和甘油三酯水平的升高，以及腹膜脂肪沉积。通过降低AST、ALT和ALP酶活性，豆蔻粉补充也可预防肝功能障碍。豆蔻粉中酚类化合物的存在可能是HCHF饮食诱导肥胖大鼠肝脏保护和抗氧化能力提高的主要原因。本研究为利用豆蔻粉改善肥胖和代谢综合征的功能性食品概念开辟了新的途径。