背景：心肌肌钙蛋白（cTnT和cTnI）作为人类心肌梗死等心肌损伤的血液生物标志物，其诊断敏感性高，导致诊断特异性降低。很难判断毒理学研究中肌钙蛋白的轻微增加是否与治疗相关的反应有关。绘制准确的结论需要可靠的背景数据和基于该数据的明确标准。单次口服0.5 W/V%甲基纤维素溶液作为赋形剂后24小时，在约束下使用针筒重复采血，测量了SD大鼠、比格犬和食蟹猴血液中的cTnI和cTnT浓度。我们揭示了个体差异在基线水平和手术效果上的程度。结果可用于判断心脏肌钙蛋白治疗相关变化的判断标准。

 

 

简介：心肌肌钙蛋白（cTnT和cTnI）作为心肌损伤如心肌梗死的临床血液生物标志物，因为它们具有较高的诊断敏感性和组织特异性。由于它们的结构和功能在物种间高度保守，心肌肌钙蛋白也被用作动物实验研究中的翻译生物标记物。，尽管肌动蛋白在心脏损伤中的可用性，其高诊断灵敏度仍然是一个挑战，因为增加的诊断灵敏度不可避免地导致诊断特异性降低（即，假阳性的数量增加）。当它们应用于毒理学研究中，往往难以区分治疗相关的变化与操作的变化。因此，获取完整动物血液中肌钙蛋白水平的数据是非常重要的。Schultze等人报道SD大鼠和食蟹猴的血液cTnI测量。实验包括灌胃给药后多个时间点的仔细测量。虽然这些研究为将来的cTnI研究提供了急需的数据，但使用自动插管法进行了连续的血液取样，这与大多数毒性研究的标准程序不同。我们的目的是获得背景数据，类似于在动物中进行的典型药物毒理学研究。我们测量了SD大鼠、比格犬和食蟹猴血液中的cTnI和cTnT浓度，在单次口服0.5 W/V%甲基纤维素溶液赋形剂后，在保定状态下重复取血直到24h。

 

材料与方法：大鼠：7周龄的雌性和雄性SD大鼠，动物适应驯化2周。五只雄性和雌性动物口服0.5 W/V%甲基纤维素溶液（5毫升/公斤），使用柔性胃管和注射器。在给药后0.5、1、2、4、8h对清醒和保定动物从尾静脉收集约0.25ml/动物血液。另外，在治疗24小时后，在异氟醚麻醉下通过腹主动脉收集约2ml/动物血液。将肝素钠管内的血样立即置于冰上，在4°C 10000转离心2分钟，取血浆，保存于-80℃，直至分析。

 

犬：10至13个月大的雄性和雌性比格犬. 动物在温度23±3°C，相对湿度50±20%的条件下，上午7点到下午7点照12h。用一次性导管和注射器单剂量口服0.5 W/V%甲基纤维素溶液（5毫升/千克），对30只雄性和30只雌性动物灌胃口服。在治疗前6天（D6）和治疗前（预）和治疗后0.5、1, 2, 4、8和24小时（D0），从清醒动物的颈外静脉收集大约7.8ml（仅在D6）或每个时间点2.3ml/动物。采集的血液样品在室温下放置20-60分钟，离心（室温，3000 rpm，10分钟）获得血清，并在同一天测量或储存在-70℃直到测量。

 

食蟹猴：3-7岁，雌性和雄性食蟹猴，动物饲养26±3°C的温度下，相对湿度为50±20%，从上午7点到下午7点每天照12小时。动物提供约108g/动物/天的HF灵长类动物J12G颗粒饲料，并可以自由地获得饮用水。动物在试验条件下驯化2周，在此期间，以与甲基纤维素溶液相同的方式用饮用水（10毫升/动物）处理动物。10只雄性和10只雌性动物用一次性导管和注射器给予0.5 W/V%甲基纤维素溶液（5毫升/千克）。在给药前13天和未给药前及给药后0.5、1、2、4、8和24h对未麻醉及保定状态下的猴，从股静脉抽取4.5ml（-D13） 血液。

 

临床检验方法：对大鼠、狗和食蟹猴测定cTnI和cTnT水平。CK和LDH水平也在狗和猴中进行测量，以监测剧烈运动的效果。所有的测试方法都验证了其测定精度、测定精度和冷冻稳定性。

 

结果：大鼠：血浆cTnI水平低于在几乎所有时间点的定量下限，除了在给药后2小时一只雄性和2只雌性，及给药后4小时1只雄性。检测水平为0.015～0.028 ng/ml。血浆cTnT水平的所有时间点均低于量化下限（BLUQ）。

 

犬：除2条雄犬外，其他动物均检测到血清cTnI水平。血液cTnT水平，一条雄性和五条雌犬在整个检查期间显示出可检测的但较低的水平。其他动物在所有点都显示出低于量化下限。没有动物在整个检查期间表现出异常的LDH值。一条雄犬和两条雌犬在给药后8小时CK值高于在预给药时的CK值。这些动物cTnI或cTnT中没有发现较高的CK值的相应变化。

 

食蟹猴：三只雄性和一只雌性在检查期间显示了低水平的cTnI。只有两只雄性显示低但可检测的cTnT值。虽然CK或LDH水平较高，但在cTnI或cTnT水平上无明显相关性。

 

结论：对于cTnT，其值大多是BLQ，比cTnI更频繁。这可能归因于所使用的测量系统的差异。对于大鼠，所有的cTnT测量是BLOQ，因此，我们不需要考虑个体变化或操作效果。