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免疫磁珠分离技术联合流式细胞术检测ENU致大鼠体内Pig⁃a基因突变

2018年07月02日 浏览量: 评论(0) 来源:中国实验动物学报 2018年第2期 作者:秦美蓉 郑丹丹 黄泽愉 王晓炜 李俊鹏 王平 责任编辑:admin
摘要:结合免疫磁珠分离技术和流式细胞术两种方法,对大鼠外周血突变型红细胞进行富集和检测,优化大鼠外周血 Pig⁃a 基因突变试验方法。

目的:  结合免疫磁珠分离技术和流式细胞术两种方法,对大鼠外周血突变型红细胞进行富集和检测,优化大鼠外周血 Piga 基因突变试验方法。

方法:  204080mg/(kg·bw)剂量的N乙基N亚硝基脲(N ethylNnitrosourea,ENU)连续3d给予SD大鼠,在染毒前、染毒后第71428天分别采集大鼠外周血,经免疫磁性分离柱富集RETCD59-RBCCD59-,用流式细胞术分别对免疫磁珠分离柱前和柱后的外周血红细胞进行计数。

结果:  与对照组相比,ENU各剂量组的RETCD59-RBCCD59-发生率均显著升高(P <0.05);采用免疫磁珠分离技术后,可以在3min内完成一个样品的 Piga 基因突变检测,分析的RETCD59-RBCCD59-细胞数量分别最高可达2× 104个或9×104个。

结论:  本研究联合运用免疫磁珠分离术和流式细胞术,建立并优化了大鼠体内 Piga 基因突变试验方法,实现了高通量检测,提高了试验的准确性和效率。 

全文阅读:免疫磁珠分离技术联合流式细胞术检测ENU致大鼠体内 Pig⁃a 基因突变

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