三种小鼠RNA病毒样品储运条件对核酸检测的影响
2018年06月26日
来源:中国比较医学杂志2018年第4期
作者:李欣悦 佟巍 张丽芳 阮研硕 丛日旭 向志光
责任编辑:admin
摘要:分析实验动物小鼠三种肠道病毒MHV、Reo⁃3、MNV生物样品的储运条件对病原核酸检测结果的影响。
目的: 分析实验动物小鼠三种肠道病毒MHV、Reo⁃3、MNV生物样品的储运条件对病原核酸检测结果的影响。
方法: 将MHV、Reo⁃3、MNV三种RNA病毒与小鼠盲肠内容物混合制备参考品;保存剂包括RNA提取试剂裂解液(BufferAVL)及生理盐水,存储温度为4℃及室温(22℃~25℃);在保存1、2、3、7、14d时间点提取各样品核酸,采用实时荧光定量PCR方法检测病毒样品量的变化。
结果: 生理盐水作为保存剂核酸样品检出量低于RNA提取试剂裂解液组,且检出量下降明显;BufferAVL组样品储于4℃条件的样品检出量优于室温25℃的条件; 4℃⁃buffer AVL组的三种病毒参考品在3d时间点的病毒检出量在50%以上,在7d时间点仍有检出,但14d时已 检测不到。
结论: 三种小鼠RNA病毒样品储运条件优选使用RNA提取试剂裂解液,并在低温条件下储运,最好在3d内完成核酸检测。
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