低铁饲料饲喂加定期少量放血建立的缺铁性贫血大鼠模型
(1)复制方法 ①参考AOAC配方,由低铁基础饲料、微量元素混合物及维生素混合物配方组成。在此基础上,将酪蛋白改为鸡蛋清蛋白(每100g新鲜鸡蛋清含蛋白质1g计算),纤维素改为微晶纤维素。低铁饲料配方中除玉米淀粉、玉米油、鱼肝油、维生素B12外,其余均为分析纯。此低铁饲料配方中经测定,其含铁量每千克饲料约含元素铁4.8mg。②体重约为65g,经测定其Hb含量≥130g/L的4周龄断乳SD大鼠。随机分为对照组(C组)和缺铁性贫血组(IDA组),两组大鼠均喂低铁饲料,自由进食,饮去离子水。对照组于造模开始即给予右旋糖酐铁5mg腹腔注射,以后则以此剂量每周腹腔注射1次。每周记录1次体重,并经尾静脉采血测Hb。从第3周起,IDA组除饲喂低铁饲料外,尚辅以尾静脉放血,2次/周,放血量为每只每次约1~1.5ml(视体重及前1周Hb含量而定,最多不超过总血量的10%)。经过约8周放血,IDA组大鼠Hb测定值均≤60g/L。此时停止放血,观察2周,Hb值仍呈继续下降趋势,于第10周颈椎脱臼处死动物,测定血清总蛋白、白蛋白、 Hb含量,并作血清铁及总铁结合力测定等指标测定。
(2)模型特点 肉眼观察当大鼠Hb≤100g/L时,模型大鼠耳朵、脚爪均出现明显苍白,随贫血程度加重,大鼠被捉住挣扎时其唇、舌发绀现象消失。造模早期(约在缺铁饲料喂养的第3周,Hb值为100g/L左右时),模型大鼠表现为兴奋,烦躁不安,喜打架,易咬人等攻击行为;同等条件下,对照组大鼠则表现为安静,温顺;随贫血程度加重,尤其当Hb≤60g/L后,模型大鼠则表现为倦怠,活动减少,怕冷,喜蜷缩成团。造模过程中,模型大鼠抵抗力下降,易感染,体重增长趋缓。模型大鼠Hb测定值呈持续性下降,至第10周时 IDA组动物Hb值可降至43g/L。红细胞、HCT、MCV、 MCH、MCHC计数IDR组均较对照组显著降低。外周血片红细胞形态光镜下观察:对照大鼠红细胞大小较为一致,血红蛋白丰满,红细胞中央淡染区无扩大,而模型大鼠红细胞大小不等,以小细胞为主,血红蛋白减少,红细胞中央淡染区明显扩大,呈小细胞低色素改变。模型大鼠血清铁、总铁结合力明显降低,运铁蛋白饱和度及红细胞内游离原卟啉(FEP)/血红蛋白(Hb)则明显增高。
(3)比较医学 迄今为止,缺铁性贫血动物模型的制备主要采用单纯缺铁饮食、缺铁饮食辅以定期少量放血或单纯放血等方法,后者现已很少应用。目前,有关大鼠缺铁时间及程度,国内外研究结果报道不一,Hb值32~86g/L、缺铁时间自3~4周到14周均有报道。本模型采用低铁饲料辅以定期少量放血的方法,在3~10周内成功复制出大鼠缺铁性贫血模型,模型动物营养指标及缺铁性贫血指标均与以往研究报道相符,有一定实用价值。