摘要：皮肤不良反应（CADR）在患者中并不少见，并且很难从非临床安全性研究中预测。非人灵长类动物（NHPs）天生就具有药物不良反应的高预测性， 本文提出了一种系统的方法来描述、分析和报告NHP毒性研究中发现的皮肤结果。实施这种方法可能会增加区分测试项目相关皮肤发现和独立于测试项目的皮肤发现的可能性。

 

 

简介：皮肤不良反应（CADRS）在患者中并不少见。住院患者药物不良反应发生率在1%～3%之间。但是，实际的患病率要高得多，因为许多轻度的CADRS没有被报道。CADR在临床表现和临床严重性方面可表现出高度的多样性，从轻度局灶性红斑到严重甚至威胁生命的广泛表皮坏死，潜在的发病机制是多方面的。用正在开发的药物进行非临床安全性研究以预测患者对药物的不良反应，这是目标。然而，关于动物的一般毒性预测研究存在争议。药物在人体和动物体内的毒性一致性。已经证明，这类研究在预测CADRS方面特别薄弱。非人灵长类动物（NHPs）经常作为相关物种用于开发中的药物产品的非临床安全性评价。在系统发育和基因或蛋白质同源性方面，它们与人类的密切接近注定了它们对药物不良反应的高预测性。

 

使用可重复、连贯和专业认可的术语对于描述明显的皮肤异常是至关重要的。经验表明，在NHP毒性研究中，以及在与其他物种的研究中，皮肤变化被描述为具有丰富的异质性术语，这些术语主要由没有接受过医学培训且在临床兽医皮肤病学诊断和术语方面没有充分培训的技术人员使用。这导致研究报告包含大量的临床观察表，不允许病理学家或毒理学家进行适当的评估、相关性或解释。为了重现性，用于描述严重可见的皮肤损伤的术语需要精确的定义。标准的定义需要被用于记录病变的工作人员使用。经验表明，如果使用这样的术语随着时间的推移保持一致，则需要迭代训练。临床皮肤病学，特别是兽医皮肤病学的文献，提供了临床皮肤病学家常用的描述皮肤病变的形态学特征的综合术语列表。. 建议每个进行NHP毒性研究的实验室建立一份由检查动物的工作人员使用的标准术语清单。应考虑这样的概念，即一些形态学代表原发性皮肤病变(即病变的初始萌发)，而另一些形态学代表继发性病变(即由原发性病变演变而来的由外部因素如自发创伤或细菌感染引起的病变)。下表可用于描述NHP中绝大多数肉眼可见的皮肤病变。病灶大小（以mm表示）和病变的精确解剖定位。为了确保解剖术语的一致使用，建议提供涉及皮肤解剖描述的所有工作人员的解剖部位的示意图。

 

皮肤病的监测和检查：毒性研究中的动物按照研究中的规定时间定期检查。应尽一切努力确保皮肤发现以一致的方式描述。这包括在给定研究中描述性术语随时间的演变，因为皮肤损伤由于次要因素而趋向于相当快的进化。因此，可以预期原发病变，例如小泡，最终破裂并形成溃疡和/或结壳。虽然一些皮肤观察可能仅仅代表了NHPs中的常见背景发现，但对研究或动物的健康没有进一步的意义（例如，与老化相关的摩擦部位的局灶性脱发或脱发），大多数调查结果需要兽医检查。各自的兽医应该在临床兽医皮肤病学方面受到培训，并且应该能够进行高级临床检查，例如皮肤刮擦、三叉拭、收集涂片用于细胞学检查、或取样用于细菌或真菌培养。这应确保快速和准确地诊断感染性疾病，如脓皮病或皮肤癣菌病，虽然很少见，但可能发生在圈养猕猴。虽然很少进行，但在NHP毒性研究的生命期收集皮肤活检应该被考虑，特别是如果皮肤病变不常见，并且关于其发病机制和相关性不清楚。如前所述，皮肤病变的大体形态学随时间改变，与之相关的组织病理学也随之改变。因此，定时的皮肤活检是研究主任、负责动物健康的兽医和研究病理学家之间应该密切合作讨论的一个重要方面。下面是如何收集活检的细节。由于GLP认证的实验室中经常使用的电子数据采集系统通常不设置活检收集，，因此应考虑如何记录和报告采样，以及这些活检获得的病理组织学结果。

 

组织病理学和组织病理学取样：这种取样是以标准化方式进行的，在进行NHP毒性研究的大多数组织中，组织学检查的皮肤是从腹部皮肤取样的。虽然这种取样模式可能被认为适合于没有皮肤发现的常规研究，对于任何肉眼可见的皮肤发现的动物来说，这是不够的。在研究的生命阶段观察到的任何皮肤发现都应该在尸检时证实其存在。需要精确地记录发现的解剖学定位。这就要求尸检人员熟悉如何检测病变皮肤。原则上，有两种不同的采样皮肤的技术用于组织病理学：一种是楔形切除样本。该技术应常规用于大多数皮肤损伤。重要的是要确定样本的定向，使其包含正常未受影响的皮肤的一部分，病变的边缘，以及理想的病变中心。如果皮肤发现深层皮肤（如结节或某些轮状物）受累，则应注意尸检时采集的皮肤样本含有足够的皮下脂肪和筋膜软组织。如果脱发是病变的主要特征，则样本应同时包含有毛和无毛皮肤，它应该以纵向位置平行于皮肤出现的毛发轴的方向来定向。获得皮肤样本的第二种技术是使用圆形活检打孔。不同的尺寸，6或8毫米冲头已证明最有用的临床和尸检设置。当病变很小或很难切除时，应穿刺活检。穿刺活检也是在研究的生命期或在需要获得多个类似病变样本的条件下进行皮肤取样的金标准。应注意，以一种方式，使病变位于活检中心。这常常需要从对侧部位的同一解剖部位取样邻近未受影响的皮肤。尸检中的皮肤损伤的取样需要彻底记录，这不仅是GLP所要求的。分析皮肤样本的病理学家了解它们的解剖起源是非常重要的。这对于使组织病理学发现、大体观察和在生活阶段记录的结果之间相互关联是至关重要的。组织病理学：使用常规显微镜的扫描物镜（1～2.5×）可以诊断出大多数皮肤病的特异性。

 

NHP毒性研究中的皮肤发现的解释需要一些关于CADRS患者性质的知识。虽然CADR的详细描述超出了本文的范围，但应考虑以下原则：直接皮肤毒性，即毒性来源于物理或化学损伤的皮肤，一般是从间接的毒性，这是分开的，毒性介导的免疫反应。间接毒性，即通过免疫反应介导的毒性。间接毒性可分为即刻反应（荨麻疹）和延迟反应。最常见的CADRS类型是刺激性接触性皮炎（ICD）和过敏性接触性皮炎（ACD）。两者在肉眼特征和组织病理学上非常相似，以红斑(红色)小斑和小泡为特征，在表皮中具有潜在的细胞间水肿和浅表真皮炎症。ICD通过损伤受损细胞释放预介体后迅速发生，但ACD是一种IV型超敏反应，起病延迟。荨麻疹是另一种常见的CADR，其发病以风疹为特征。其他形式的免疫介导的CADR并不常见，通常根据其临床模式进行分类。例如，有嗜酸性粒细胞炎和全身症状的药物性皮疹、急性全身性发疹性脓疱病、多形性红斑(EM)、固定性药疹、史蒂文斯-约翰逊综合征(SJS)和中毒性表皮坏死松解。EM已在食蟹猴上发现。EM可能通过免疫复合物在微血管中的沉积而介导，并且它涉及皮肤和粘膜。EM主要影响肢体，超过10%的表皮脱离。SJS是一种严重的EM，除了四肢，躯干和面部也受到影响，TEN是一种威胁生命的情况，其中30％以上的表皮坏死和分离。EM和TEN的组织学模式已经在兽医皮肤病理学文献中得到很好的描述，并且在人类病例报告中可以找到对其他情况的描述。

 

NHP毒性研究中药物诱导的皮肤发现需要区别于NHPs的自发皮肤疾病。这很难，在某些情况下，可能无法进行明确的区分，特别是因为NHPs中关于自发性皮肤病的描述仍然是零碎的。血清中特异性抗病毒抗体(例如麻疹病毒)的存在可能与当前的皮肤状况没有任何关联。病理学家应该知道可能引起NHPs皮肤病变的病毒疾病：圈养的猕猴可能通过与携带这种病毒的人接触而感染人类麻疹病毒。该病毒通过气雾化高度传染，可在猕猴中引起免疫抑制，继而导致各种继发性机会性感染，如念珠菌病或巨细胞病毒感染。一个典型的临床特征是人类的麻疹病毒感染的猕猴在腹部界限清楚的红斑。这些斑疹可能与表皮坏死和角膜角化过度角化有关。猴水痘病毒是一种自然存在的疱疹病毒，散发性流行。感染与腹部的红斑、丘疹和小泡有关，这些小泡可能扩散到后腿近端和/或口腔粘膜。典型的病变表现为向心分布的放射状结构。组织学将显示上皮坏死与嗜酸性的嗜酸性细胞核内包涵体。猴免疫缺陷病毒导致猕猴逐渐免疫抑制。此外，感染常伴有红斑和丘疹，常影响腋窝皮肤。猴痘病毒感染（猴痘）可引起多发性丘疹，其特征是表皮增生和坏死，与典型的嗜酸性胞浆内包涵体有关。这些病变最终导致溃疡。

 

结论：检测皮肤病变，需要一种与临床兽医皮肤病学相当的系统诊断方法。检测和表征肉眼可见的皮肤发现，在研究的整个生命阶段监测和进一步分析它们，在尸检时对它们进行记录和采样，最后将它们与组织病理学发现相关联。本文建议的严格方法将有助于解释NHP毒性研究中遇到的皮肤损伤，并最终为开发中的药物产品的安全性评估提供附加值。