小型猪再狭窄模型建立的术前准备
1.实验猪准备 选用健康实验用小型猪,体重25~35kg。支架置入前3天起,予氯吡格雷75mg,每日一次口服;阿司匹林300mg,每日一次口服。实验当天禁食,称体重并记录,以指导肝素等药物用量。核对猪号无误,经耳缘静脉置入22号套管针,开放静脉通路;套管针上标注猪号及体重。等待麻醉和手术。
2.实验器材、仪器设备和药物的准备
(1)造影相关器材:包括穿刺针、6F鞘管、引导钢丝及6F Judkins 3.5左、右冠状动脉引导导管,所有相关器材洗净、吹干后,放入甲醛熏箱中消毒。造影剂:使用非离子型造影剂碘普罗胺(Ultravist)370行冠状动脉造影。血管成像设备:GE公司生产的INOVA 2100血管成像造影机。
(2)术中用药:普通肝素(每2ml普通肝素用生理盐水稀释至12.5ml,相当于普通肝素100U/ml)。抢救用药:阿托品,肾上腺素,尼可刹米,地塞米松。术后用药:青霉素320万U溶于5%葡萄糖盐水500ml,静脉点滴。尼可刹米2支静脉推注以使实验猪尽快苏醒。
3.编号 实验动物常需要标记以示区别。编号的方法很多,根据动物的种类数量和观察时间长短等因素来选择合适的标记方法。
(1)挂牌法:将号码烙压在圆形或方形金属牌上(最好用铝或不锈钢的,它可长期使用不生锈),或将号码按实验分组编号烙在拴动物颈部的皮带上,将此颈圈固定在动物颈部。
(2)打号法:用刺数钳(又称耳号钳)将号码打在动物耳朵上。打号前用蘸有酒精的棉球擦净耳朵,用耳号钳刺上号码,然后在烙印部位用棉球蘸上溶在食醋里的黑墨水擦抹。
(3)针刺法:用七号或八号针头蘸取少量碳素墨水,在耳部、前后肢以及尾部等处刺入皮下,在受刺部位留有一黑色标记。该法适用于大小鼠、豚鼠等。
(4)化学药品涂染动物被毛法:经常应用的涂染化学药品有涂染红色:0.5%中性红或品红溶液。涂染黄色:3%~5%苦味酸溶液。涂染黑色:煤焦油的酒精溶液。根据实验分组编号的需要,可用一种化学药品涂染实验动物动物背部被毛就可以。如果实验动物数量较多,则可以选择两种染料。该方法对于实验周期短的实验动物较合适,时间长了染料易退掉:对于哺乳期的子畜也不适合,因母畜容易咬死子畜或把染料舔掉。
(5)剪毛法:方法是用剪毛刀在动物一侧或背部剪出号码,此法编号清楚可靠,但只适于短期观察。
(6)打孔或剪缺口法:可用打孔机在兔耳一定位置打一小孔来表示一定的号码。如用剪子剪缺口,应在剪后用滑石粉捻一下,以免愈合后看不出来。该法可以编至1~9999号,此种方法常在饲养大量动物时作为终身号采用。目前在小型猪模型中,此类编号方法最为常用,但如果不是单笼饲养,应警惕动物之间相互撕咬后造成标记模糊,应及时重新选用其他方法标记。
4.固定方法 实验猪的抓取:抓猪时一定要掌握安全的原则,包括人身安全和猪体安全。猪对抓猪人的防御攻击是它的本能,一定不能麻痹大意,要避开猪的攻击,不要被挫伤或咬伤。在平地或运动场内抓猪最好准备一个高0.8m,长1.2~1.5m的折叠围栏,用围栏把要抓的目标猪挤在一个小角落,面积尽量缩小,然后在猪的后边伸手抓住后肢髋骨部,提起来离开地面。如果在笼内,采用机械或徒手抓。设法把猪赶到头部背向你,尾部向你,伸手抓住后肢拉出笼。也可直接抓住耳朵固定,拉出笼外,再抓住后肢。假若猪太凶,无法靠近,则采用抓猪棒。抓猪棒的设计很简单,一根木棒,在一端套一个绳圈。用绳圈套住猪的嘴然后拧紧固定抓住。
猪的固定方法依据实验的内容,手术的部位方法而定。一般采用三种固定方法,仰卧固定,俯卧固定和倒立提举固定。猪麻醉后将猪仰卧在平板或槽内四肢用绳固定,其他部位根据手术需要用绳或卡板,再给予固定。
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