1．小型猪的术后护理  小型猪的术后护理相当重要，如果没有得到足够的重视，则很有可能导致实验动物的非正常死亡，尤其在小型猪术后最初的72小时内，尤其需要严格护理。因此，术后护理工作应该得到与置入手术相同的重视程度。

小型猪护理的最终目的是使实验猪在所试验条件下(指药物/手术)维持正常的代谢反应，或早日康复，使实验顺利完成。对实验猪的护理要做好以下几方面的工作：适宜的生活环境，科学的饲养，严格的管理制度。

适宜的环境，主要是指饲养实验猪的动物房内温度、湿度、有害气体的含量(空气净度)。实验猪对环境的要求比一般生产型猪要高，因为它已经处于实验条件的应激下而不是正常的生理状。机体的抵抗力及免疫能力下降，不良的环境可以造成试验猪患病或导致死亡，影响实验完成。猪房的温度要求18～25℃，空气相对湿度55％～65％，猪房内需备有空气交换即排风设备，以及时排除有毒的氨气，硫化氢等有毒气体，增加空气的流动性，降低有害气体的浓度。

实验猪的饲料营养要高于生产型猪，以满足康复和抵抗药物应激所消耗养分的需要。饲料的喂量不能过量，手术后料量渐增，体重<10kg的实验猪日喂量为0.3～0.5kg/d，体重10～15kg的实验猪日喂量为0.5～0.7kg/d。小型猪术后应每天坚持应用阿司匹林300mg以及氯吡格雷75mg至处死。

实验猪的管理包括两大方面的内容：①严格按实验的要求及时注射、给药、外伤换药，并按要求观察记录，收集粪尿标本，整理资料；②及时发现实验猪的异常现象，给予相应处理。对试验猪的观察内容主要看粪尿有无异常(排量、形态及颜色等)，食欲变化，皮肤有无疱疹、脱毛现象，可视黏膜的颜色、湿度、出血现象等，形态行为异常如全身颤抖，可查一下体温，其他的内脏病或中毒等，精神委靡不振，黏膜苍白常见于贫血，猪在笼子上蹭痒常见于寄生虫或过敏，观察肛门是否水湿，常见于下痢，鼻镜干燥是体温较高的表现，腹部上抽腰背拱起是肠道疾病的表现，呼吸频率快，胸腹呼吸，鼻镜发紫，是呼吸困难的表现，发现猪在笼子中打转，伴呼吸困难需考虑脑炎或中毒性疾病，发现猪卧地不起要检查猪的四肢是否有伤，如果同时伴有精神不振需怀疑全身内科疾病等。一旦发现异常情况，应及时对症处理。

实验猪的注射给药方法：一般为皮下注射，静脉注射，肌肉注射和腹腔注射。皮下注射是指颈部及股内侧，肌肉注射主要指肌肉发达，神经血管较少的颈部和臀部。给猪投药一般使用一个长颈瓶或容器，通过嘴角压住舌面，缓缓投入；或者用导管投入。有些少量粉剂可以调成糊状，抹到舌面上，靠唾液自行吞咽下去。

2．小型猪的处死以及支架段标本的取材

(1)小型猪的处死过程应遵循3Rs原则，即进行安死术(euthanasia)，即达到没有惊恐或焦虑而安静地、无痛苦地死亡，最大程度上避免实验动物的痛苦。因此均需要较为深度的麻醉，以达到实验动物神经系统立即达到失去痛觉的早期抑制作用。如果可能，即将处死的动物不应和其他动物在同一个房间里。安乐死之后，确认动物死亡非常关键。死亡症状有心跳、呼吸停止，反射缺失。可通过放血或取出心脏，毁损大脑，断头，切除内脏，出现尸僵等来确保动物死亡。

小型猪动物模型中的处死多采用放血法或心腔注射氯化钾法。前者在实验动物深度麻醉后，即从股动脉鞘管开始放血，建议应用7F动脉鞘管以及强化肝素化以保证放血通常，此种方法相对方便，但处死时间相对较长，若鞘管被血栓堵塞则无法进行。而心腔内注射氯化钾方法相对迅速，予15％氯化钾溶液10～20ml心腔内注射，可是心脏骤停于舒张期。但心腔内注射有一定几率损伤支架段冠状动脉，操作时应尽量小心。

(2)小型猪冠脉标本的取材(图5-8)：待小型猪被处死之后即刻开始血管标本的取材，以保证标本的新鲜。首先在分离胸前皮肤肌肉组织，暴露肋骨，用开胸器分离肋骨或直接折断心脏前两根肋骨以充分暴露心脏。徒手尽量钝性分离周围结缔组织，必要时需用眼科剪剪开壁层心包，若小型猪出现心包粘连，则对取材造成一定困难。找到升主动脉以及肺动脉后，用手将其提起，在远段离断，即可把心脏完整托出。注意一定避免在上述操作过程中，损伤到支架血管段，尤其是将支架压扁以及用锐器损伤。因此操作用时刻注意支架位置以及尽量避免过多使用锐器。

心脏分离出来后应立即开始加压灌洗。根据标本的用途不同，灌洗液分为中性甲醛(福尔马林)、戊二醛以及PBS液等。

1)10％中性甲醛：自行配制，配制过程如下：①0.2mol/L PBS(pH 7.4)：A液(0.2M NaH2PO4)：NaH2PO4·2H2O 3.12g，加蒸馏水至100ml；B液(0.2M Na2HPO4)：Na2HPO4·12H2O7.16g，加蒸馏水至100ml；19ml A液与81ml B液混合即为0.2mol/LPBS。②0.01mol/L PBS(pH 7.4)：0.2mol/L PBS(pH 7.4)50ml，NaCl 8.5g，加蒸馏水至1000ml。③10％中性甲醛：甲醛溶液250ml，加0.01mol/L PBS(pH 7.4)至1000ml。

2)3％戊二醛固定液：自行配制，配制过程如下：①2mol/L PBS(pH 7.2)：A液：KH2PHO42.722g加蒸馏水水至100ml：B液：Na2HPHO4·12H2O 7.163g加蒸馏水至100ml；A液：B液=1：4。②3％戊二醛固定液：2mol/L PBS(pH 7.2)1000ml加50％戊二醛120ml。

灌洗过程应用专门的灌洗设备，保证100～120mmHg压力进行灌注。灌注时夹闭肺动静脉以及主动脉分支，从升主动脉断端插管进行灌洗，灌洗时间20～30分钟。灌洗后可见心脏充分膨胀，冠状动脉血管清晰可见(图5-9)。

灌洗后即可开始取材。有时支架段血管已清晰暴露，因此可直接在支架段血管部位进行仔细分离。有时支架段血管被脂肪组织掩盖或实验动物出现心包炎等，增加取材困难，此时可考虑从左主干开始仔细分离，以避免不必要的损伤。

操作时应注意尽量去除血管外膜外的脂肪组织和结缔组织，但要小心避免损伤血管本身，对于有些明显正性重塑的血管周围结缔组织异常增殖，可考虑整体取材，以避免修剪时损伤支架。

取材后应迅速投入相应的装有固定液的容器中，避免容器过小从而无法充分固定，理论上至少应用10倍标本体积的固定液进行固定。若进行分子生物学研究的标本，应尽量在冰上操作，动作应尽量迅速，取材后马上投入液氮中。

取材时除支架段血管外，应同时取材支架两端loram的冠状动脉以及支架血管段两侧10mm内的心肌组织，以进行相应的组织形态学和病理分析。