目的：探索健脾益肺方(JPYF)对谷氨酸转运体2(EAAT2)表达的影响及可能机制｡

方法：取新生 24h内的SD幼鼠,无菌条件下取出幼鼠大脑皮层星形胶质细胞,分离､提纯､原代培养以进行后期实验;调整适宜 的细胞浓度分5组种板,分别为A:谷氨酸组(250μmoL/L),B-D:JPYF方(0.25､0.5､1g/kg)+谷氨酸组,E:正常 组,以JPYF方(终浓度为0.25､0.5､1g/kg)作用B-D组24h后,谷氨酸250μmoL/L作用A-D组4h诱导建立体外 培养原代星形胶质细胞损伤模型;采用噻唑蓝(MTT)法测定各组星形胶质细胞存活率,紫外比色法检测培养基上 清谷氨酸浓度,细胞免疫荧光法(immunofluorescence)､Western blot检测星形胶质细胞EAAT2的表达量,IF法检测 原代脊髓神经元细胞存活情况｡

 结果：JPYF方可显著保护星形胶质细胞(P<0.01),提高谷氨酸转运蛋白的表达 (P<0.05,P<0.01),降低细胞外液谷氨酸浓度(P<0.05,P<0.01),减少神经元损害(P<0.05,P<0.01),在0.25~1 g/L的剂量上呈现一定的量效关系｡

结论：JPYF方可减少谷氨酸对原代脊髓运动神经元细胞的损伤,其机制可能 是JPYF方提高EAAT2的表达,降低细胞外液谷氨酸浓度,从而起到保护神经元的作用｡

全文阅读：中药健脾益肺方对EAAT2表达的影响