摘要：目的：本研究的目的是利用多模态成像技术，鉴别不同年龄段的食蟹猴视网膜和脉络膜的形态特征。

 

方法：共研究了27只无眼部疾病的食蟹猴（平均年龄104.2个月；范围1.2-223.6个月）。从每个受试猴身上获得多模态成像。根据年龄比较四个亚组的形态学特征。

 

结果：在光谱域光学相干断层扫描（SD-OCT）中，非婴儿食蟹猴（21/21，100%）视网膜外可见4条高反射带，而6只婴儿食蟹猴则未见交叉指状带。大多数患者的视网膜色素上皮（RPE）后方可见狭窄的低反射带 (25/27, 92.6%)。在83.3%的婴儿食蟹猴中可见脉络膜-巩膜连接（CSJ），但在成年食蟹猴中只有12.5%和老年食蟹猴中只有14.3%，在青少年食蟹猴中不可见。婴儿组和其他三组的CSJ可见度有显著差异。近红外反射成像（NIR）能清晰地观察脉络膜血管通过视网膜镶嵌眼底。在未成年食蟹猴中发现了一些颗粒点，它们随着年龄的增长而急剧积累，但在婴儿食蟹猴中却不存在。

 

结论：多模态成像可以观察到食蟹猴受试猴的显著形态特征，这些特征随年龄的不同而明显不同。值得注意的是，幼年食蟹猴没有交叉区，而其他食蟹猴没有可见的脑脊液，但有明确的脉络膜毛细血管。在未来的动物研究中，应认真考虑年龄和特征。

 

 

简介： 食蟹猴由于其眼睛与猴眼的高度相似，被广泛用作眼部疾病的实验动物模型。许多猴的眼部疾病，如年龄相关的黄斑变性（AMD），也可以在猴身上观察到。由于猴的眼球解剖结构与猴类接近，因此临床成像技术，包括彩色眼底摄影（CFP）、眼底自体荧光（FAF）、荧光素血管造影（FFA）和吲哚青绿血管造影（ICGA）等，很容易适应灵长类动物的研究。近年来，多模式成像方法，包括光谱域光学相干断层扫描（SD-OCT）和近红外反射（NIR）成像已被应用于解决猴类的形态学特征。然而，很少有研究集中在食蟹猴的眼部形态特征上，所得图像的焦点一般局限于脉络膜和巩膜。目前还没有关于食蟹猴视网膜显微结构的研究报告。本研究以健康食蟹猴为研究对象，采用CFP、NIR、FFA、ICGA及增强深度成像OCT（EDI-OCT）等多模式成像技术。本研究的目的是描述视网膜和脉络膜的显微结构，并比较不同年龄组猴眼的特征。

 

方法：动物：本研究选取了27只无眼疾病的食蟹猴，于常规半年体检时随机抽取。在研究期间，所有食蟹猴都是临床健康的。根据食蟹猴的生命周期，所有食蟹猴按年龄分为四个亚组：婴儿（n= 6，1-4个月）、未成年猴（n =6，4-5岁）、成年猴（n= 8，8-10岁）和老年猴（n= 7，17-18岁）。在所有的食蟹猴中，只选择一只眼睛进行分析。右眼为偶数出生月的受试猴，左眼为奇数出生月的受试猴。本研究排除了出现视网膜或脉络膜病变或屈光度≤-3.0d或≥3.0d的动物。

 

多模态成像：所有受试猴均接受了多模态成像，包括CFP、FAF、NIR成像、带EDI模式的SD-OCT、FFA和ICGA。对所有受试猴的多模图像进行评价。所有检查均由一名研究猴员（P.R.）完成。简言之，食蟹猴在通常的12小时：12小时的光/暗循环后的早晨，用10 mg kg?1氯胺酮盐酸盐和20 mg kg?1硫代乙酰胺肌肉内镇静，随后用托吡卡胺扩张瞳孔。将成像设备的头部和下巴托移除，并用定制的金属棒替换，以使动物的头部舒适地休息。完整的眼科检查包括裂隙灯生物显微镜检查、眼底扩张生物显微镜检查、CFP检查、同时进行FFA和ICGA检查以及EDI-OCT检查。同时根据标准制造商的协议进行FFA和ICGA。在高分辨率电子数据交换模式下，在高分辨率EDI模式下，采用单次30°水平线扫描，1536A扫描和B扫描，以中央凹为中心，进行光谱域OCT成像。使用海德堡眼球跟踪自动实时（ART）软件，每个B型扫描的平均扫描次数为100次（范围为50-100次）。近红外眼底自发荧光30°图像是由HRA2获得的，激发波长为787nm。

 

图像分析：首先，对视网膜外层的显微结构进行了综述。四个高反射带，包括外限制膜（ELM）、椭圆体区（EZ）、交叉区（IZ）和RPE，被识别并定义为“不存在”或“存在”。其次，测定了脉络膜毛细血管的可见度。CC能见度被认为是一个窄的低反射率带，刚好在RPE带的峰值强度之后。第三，研究脉络膜-巩膜交界处（CSJ）的能见度。清晰的CSJ是指相对较低的反射区和相对较高的反射区之间的明显分界线。为了排除与导致缺失的OCT光束方向相关的伪影的可能性，使用增强深度成像（EDI）模式对每个食蟹猴进行了多个垂直和水平OCT切片。使用带有IMAGEJ软件的纵向反射率剖面（LRP）对距中央凹2.5 mm的层完整性进行评估。为了比较反射率分布，左眼的图像是相反的。在猴工合成的LRP中识别出视网膜外的四个高反射微层：外限制膜（ELM）、椭圆体区（EZ）、交叉区（IZ）和RPE。对于每只眼睛，在10次相邻的A扫描中平均反射率值，以中央凹为中心，并在标准化后以0到1.00Gy标度单位的比例呈现到与RPE相对应的高反射带的峰值，该峰值被指定为1.0。来自不同眼睛的反射率分布沿着这个高反射RPE带的后边界对齐，以便平均。

 

结果：所有受试猴均未观察到病理变化，因此分析了27只眼的多模图像。动物的平均年龄为104.2个月（1.2-223.6个月），其中14只（52%）雌性和13只雄性（48%）。研究对象包括15（56%）只右眼和12（44%）只左眼。CFP、FAF、FFA和ICGA均未发现显著特征。但是，EDI-OCT和NIR反射眼底摄影有显著的特点。与猴类相似，SD-OCT视网膜外层有四条高反射带，分别是ELM、EZ、IZ和RPE/Bruch复合体。尽管在100%（27/27）的受试猴中，ELM、EZ和RPE/Bruch复合物被清楚地显示出来，但在食蟹猴中观察到的IZ较少（21/27，77.8%）。亚组分析显示，100%（6/6）的婴儿食蟹猴中不存在IZ。从所有图像中获取视网膜和脉络膜的LRP，距中央2.5 mm，并进行比较。幼年和老年食蟹猴的LRP与成年食蟹猴相似。在所有的食蟹猴中，LRP都能清晰地观察到视网膜外的三个峰和一个谷。从视网膜到脉络膜，所有组的ELM第一峰都是温和的，ELM下的第二峰是EZ的代表。然而，第三峰的形状在幼年食蟹猴和成年食蟹猴之间差异很大。根据IZ和RPE，成年猴组出现双峰（M-型），而婴儿组则出现单峰（N-型），没有IZ。

 

健康食蟹猴脉络膜毛细血管与脉络膜-巩膜交界处的可视化:在92.6%（25/27）的眼睛中发现CC层，它显示为一条狭窄的低反射带，刚好在RPE带的峰值强度后面。亚组分析显示，2只婴儿食蟹猴的脉络膜毛细血管层不可见。LRP，在RPE下面有一个凹口状的槽指的是CC层。对于婴儿而言，这个凹槽又窄又浅。CC层的可视性没有显著差异（P>0.05），值得注意的是，只有7只食蟹猴（25.9%，7/27）能清楚地识别出CSJ。CSJ在83.3%（5/6）的婴儿中可见，但在任何一个未成年猴（0%，0/6）中均不可见，仅在12.5%（1/8）的成年猴和14.3%（1/7）的老年食蟹猴中可见。婴儿和其他三组儿童的脑脊液可见度有显著差异。

 

近红外光谱观察到脉络膜血管网：从每只动物身上获取近红外图像。有趣的是，在幼年食蟹猴中出现了一些在猴眼底无法观察到的颗粒点。此外，这些颗粒斑点随着年龄的增长而累积，而在婴儿食蟹猴的眼底则没有这种斑点，这一趋势是显而易见的。同时OCT扫描显示这些颗粒与脉络膜的血管成分相对应。脉络膜血管通过视网膜可见，这四个组均可观察到豹纹状眼底。一幅来自成年食蟹猴的红外反射图像显示，这些豹纹图案与脉络膜血管相似。同时OCT扫描显示这些条纹与脉络膜血管相吻合。

 

结论：所有年龄组的食蟹猴都进行了多模式成像，包括CFP和FAF、FFA、ICGA、NIR成像和EDI-OCT。结果表明，用EDI-OCT对食蟹猴视网膜外微结构、脉络膜毛细血管和CSJ进行横断面可视化，同猴类记录的数据相比是非常独特的。据我们所知，这是对不同年龄的食蟹猴视网膜和脉络膜的首次体内研究。与年龄匹配的猴相比，SCJ不可见，因此，除婴儿外，大多数使用SD-OCT的食蟹猴脉络膜厚度不可测量。此外，婴儿食蟹猴没有IZ。我们推测，在没有IZ的情况下，婴儿食蟹猴可能是一个理想的模型，用来识别视网膜中这种微结构的成分和病理意义，这被认为是对视觉功能至关重要。