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Hpd基因修饰制备高酪氨酸血症III型巴马小型猪模型
2019年06月19日
来源:中国比较医学杂志2019年第5期
作者:顾鹏 陈傍柱 徐涛 刘闻 邓俊成 徐名衬 袁进 陈恩生 顾为望
责任编辑:admin
摘要:利用 CRISPR/Cas9 技术敲除巴马小型猪 4-羟基苯丙酮酸氧化酶(4-OH phenylpyruvate dioxygenase,4HPPD/HPD)制备高酪氨酸血症 III 型巴马小型猪模型。
目的:利用 CRISPR/Cas9 技术敲除巴马小型猪 4-羟基苯丙酮酸氧化酶(4-OH phenylpyruvate dioxygenase,4HPPD/HPD)制备高酪氨酸血症 III 型巴马小型猪模型。
方法:分别从质粒 pGL3-U6-gRNA-PGKpuromycin和 pST1374-NLS-flag-linker-Cas9 中通过PCR扩增sgRNA-Hpd和Cas9体外转录用模板,接着体外转录出 Cas9mRNA和sgRNA-Hpd,最后将Cas9mRNA和sgRNA-Hpd共注射入巴马小型猪受精卵的胞质内,以制备Hpd 基 因敲除巴马小型猪。
结果:胞质内共注射后,共移植20枚受精卵至2只代孕母猪。 获得子代 Hpd 基因敲除巴马 小型猪共4只。
结论:本研究成功制备了高酪氨酸血症III型巴马小型猪模型,将为研究酪氨酸代谢通路提供更 好的模型。
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