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小鼠、大鼠、食蟹猴与人的脂肪干细胞分离培养方法和生物学特性的比较分析
目的:比较分析实验动物脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells, ADSCs)与人脂 肪间充质干细胞的分离培养方法和生物学特性的差异,为自体脂肪干细胞移植治疗人类疾病的临床前研究提供临 床前的实验数据和方法。
方法:将临床患者、食蟹猴、C57小鼠和SD大鼠的皮下脂肪组织进行分离培养后得到人 脂肪间充质干细胞(hADSCs)、食蟹猴脂肪间充质干细胞(cynomolgus monkey adipose-derived mesenchymal stem cells, cADSCs)、小鼠脂肪间充质干细胞(mouse adipose-derived mesenchymal stem cells, mADSCs)和大鼠脂肪间充质 干细胞(rat adipose-derived mesenchymal stem cells, rADSCs);采用流式细胞术鉴定ADSCs表面标记物;细胞成脂、成 骨诱导分化,于诱导后21d和28d固定染色,鉴定ADSCs的成脂成骨分化能力。
结果:hADSCs、cADSCs、mADSCs 和rADSCs的分离培养方法类似,贴壁培养后均呈成纤维细胞样生长;流式检测显示,不同物种ADSCs间充质干细 胞表面标记物CD90、CD29为阳性,少量表达造血干细胞标记物CD34,血管内皮细胞标记物CD31为阴性。 成脂和 成骨分化能力检测显示,hADSCs、cADSCs、mADSCs和rADSCs和均具有成脂成骨分化能力,但其成脂成骨分化的时 间略有差异。
结论:实验动物ADSCs与hADSCs采用相同的分离培养方法,有类似的表面标记物表达及成脂成骨 分化潜能,生物学特性具有一致性,是自体脂肪干细胞移植临床前研究的良好模型。
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