小鼠生殖细胞特异性转录因子SOHLH1调控 Sox30基因表达的机制
2019年08月12日
来源:中国比较医学杂志2019年第7期
作者:齐婉婧 孙奇 李媛 张雪 金美玉 何岩 郑志红
责任编辑:admin
摘要:SOHLH1(Spermatogenesis-and oogenesis-specific bHLH transcription factor-1)和SOX30(SRY box)是与精子发生相关的转录因子,Sohlh1与 Sox30的基因敲除雄鼠均丧失生育能力。 出生后7天 Sohlh1基因敲 除雄鼠DNA芯片显示Sox30表达显著下调,本文探究了早期发育相关转录因子SOHLH1对精子发生后期的关键基因 Sox30基因的转录调控作用。
目的:SOHLH1(Spermatogenesis-and oogenesis-specific bHLH transcription factor-1)和SOX30(SRY box)是与精子发生相关的转录因子,Sohlh1与 Sox30的基因敲除雄鼠均丧失生育能力。 出生后7天 Sohlh1基因敲 除雄鼠DNA芯片显示Sox30表达显著下调,本文探究了早期发育相关转录因子SOHLH1对精子发生后期的关键基因 Sox30基因的转录调控作用。
方法:构建 Sox30启动子荧光素酶表达质粒,瞬时共同转染 Sox30荧光素酶表达质粒和 Sohlh1真核表达质粒并利用荧光素酶活性测定实验检测荧光值。通过染色质免疫共沉淀实验检测 SOHLH1与 Sox30启动子DNA序列特异序列的结合情况筛选主要激活位点。
结果:共转染 Sohlh1真核表达质粒和Sox30启动子区域荧光素酶质粒的实验组荧光素酶活性高于对照组。 SOHLH1与 Sox30启动子上的特异性位点 结合,在-489bp位点的结合作用最强。
结论:精子发生早期重要转录因子SOHLH1可以直接激活顶体形成相关 基因 Sox30转录,-489bp(CAGGTG)为主要特异性结合位点,丰富了精子发生中延时翻译表达调控的现象并进行 了调控机制的初步探索。
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