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过表达 JAZF1对甲状腺乳头状癌BCPAP细胞增殖、凋亡的影响及其机制
目的:探讨相互并列的锌指基因1(juxtaposed with another zinc finger gene1,JAZF1)对甲状腺乳头 状癌(papillary thyroid cancer,PTC)BCPAP细胞增殖、凋亡的影响及可能的作用机制。
方法:采用重组腺病毒AdvJAZF1-GFP、Adv-GFP分别感染BCPAP细胞,分为阴性对照组(NC组)、空载组(Adv-GFP组)、实验组(Adv-JAZF1GFP组),感染48h 后分别提取各组细胞总 RNA、蛋白,采用实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)、Western blot 检测 JAZF1mRNA、蛋白表达水平,MTT、克隆形成实验检测细胞生长及增殖能力,流式细胞术annexin V-FITC/PI双染检 测各组细胞凋亡情况,Western blot检测分析Bcl-2、Bax、PPAR-γ、PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达水平。
结果:与阴性对 照组、空载组比较,实验组 JAZF1mRNA、蛋白表达水平均明显上调(P<0.001),且随时间增殖能力明显抑制(P< 0.01),克隆形成能力降低(P<0.001);流式annexin V-FITC/PI双染检测结果显示实验组细胞凋亡率[(23.02± 0.35)%]较NC组[(8.63±0.40)%]、空载组[(7.95±0.32)%]均明显增加(P<0.001);Western blot结果显示实 验组Bcl-2表达较NC组、空载组明显下调66.0%(P<0.001),Bax表达明显上调64.8%(P<0.001),并显著降低pPI3K/PI3K、pAkt/Akt比值(P<0.001)。
结论:JAZF1通过调控Bcl-2/Bax通路促进细胞凋亡,并且调控PI3K/Akt 信号通路抑制BCPAP细胞增殖,从而在甲状腺乳头状癌的发展进程中可能发挥重要作用。
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