【操作步骤】病变组织浆的制备，用确诊脉管炎病人手术截肢(趾)后取病变组织剪成小块，用生理盐水冲洗至淡粉红色为止，加等量生理盐水，用高速组织捣碎机(8000～10000转/分)捣碎12min。反复冻融3次，再置60℃水浴中1h，消毒备用。用上述组织浆1ml加弗氏完全佐剂(羊毛脂：石蜡油＝1：1)1ml加死卡介苗75mg于家兔四肢内侧和耳根部作皮下多点注射，每只兔子2ml。每周1次，共注射4次。于最后一次免疫后的第10、15、30d，分别采耳静脉血分离血清，与确诊TAO(血栓闭塞性脉管炎)病人血清作对流电泳或双相琼脂扩散实验，出现沉淀线的动物继续饲养。并进行足背动、静脉，或胫后动、静脉病理观察；四肢趾(指)端观察；溃疡肢的血管及溃疡组织病理观察。

【结果分析】免疫接种2个月后，胫后动脉表现小动脉壁增厚，管腔狭窄，内膜增生变厚或脱落而不规则；外膜透明变性，少量淋巴细胞浸润。4个月后足背静脉的中段部分内膜增厚且不光滑，部分脱落；外膜有变性，淋巴细胞少。6个月后足背动脉管壁中膜增厚，部分管壁出血，中性粒细胞浸润；外膜玻璃样变性，少数淋巴细胞浸润。免疫接种536d后，动物的四肢趾(指)端均出现典型溃疡并坏死。将有典型溃疡并坏死的实验兔处死后取四肢血管及溃疡组织病检，表现为动脉管壁明显增厚、变性、出血，导致管腔狭窄闭塞及新生小血管形成，血管腔结构不清。溃疡坏死的皮肤及皮下组织：皮肤显示鳞状上皮增生，角化过度且皮肤及皮下炎症反应明显，大量中性粒细胞和淋巴细胞浸润，有灶性坏死及小脓肿形成，坏死区周围有血管内透明栓子形成。