一、实验目的

脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)是一种常见且严重的神经系统创伤，对SCI的治疗是医学研究的难点和热点。为了有效评估SCI后干预措施的效果。需要理想的复制人类SCI的实验动物模型。脊髓半横断损伤(hemi-transection spinal cord injury, hSCI)模型在SCI中较为常用。本实验将制备大鼠hSCI模型，观察其后肢运动功能的变化，为SCI的研究奠定基础。

二、实验原理

有效的动物模型是脊髓损伤修复研究的基础。因hSCI兼顾SCI且保留部分功能而被广泛用于实验研究。行为学评分法(the Basso Beattie Bresnahan locomotor rating scale, BBB评分)几乎包括了SCI后大鼠后肢恢复过程中的所有行为变化，且与SCI程度高度相符，可区分脊髓损伤大鼠运动功能的微小差异，是一种较敏感的检验方法。

三、实验材料与方法

(一)实验动物与分组

成年雌性SD大鼠20只，体重(250±5)g，随机分为假手术组(n=10)和脊髓半横断损伤组(n=10)。

(二)实验方法

1.hSCI模型制作  将SD大鼠用3.6％水合氯醛经腹腔注射麻醉(10ml/kg)，俯卧位固定于手术台。备皮、消毒，以T10棘突为中心做背部正中切口，长约3cm，紧贴棘突骨面纵行分离椎旁肌，直达椎板表面，用牵开器向两侧牵开椎旁肌，暴露椎骨，咬除T9～T10椎板并打开椎管，充分暴露脊髓，挑起脊髓用虹膜剪完全剪断左半侧T10脊髓，同侧后肢瘫痪，刺激无反应后，依次缝合肌肉、皮肤。假手术组大鼠仅打开椎管，不损伤脊髓。各组大鼠单独饲养，注意保温。术后连续3d腹腔注射青霉素(2×10000U/只，1次/d)。每天挤压膀胱排尿3次，直至膀胱功能恢复。

2.行为学评分(BBB评分)  采用3人独立观察记录，于术后7d、14d、21d、28d对各组大鼠双侧后肢运动功能分别进行评分。将大鼠置于宽阔的木床上，任其爬行，观察其后肢的运动，依据文献，评定其得分并作记录(见表2-1)。

(三)统计学分析

结果以均数±标准差(x-±s)表示，应用SPSS17.0统计软件包对数据进行正态性检验。以t检验比较两组大鼠BBB评分的差异，P<0.05表示差异有统计学意义。

四、实验结果

术前每只大鼠BBB评分均为21分。假手术组大鼠各时间点双侧后肢运动功能均为21分。hSCI组大鼠在短时间内左下肢功能完全丧失，肌力为零，术后3～6d，大部分大鼠左侧后肢开始挛缩，右侧下肢活动正常。术后7d、14d、21d、28d，hSCI组大鼠左后肢评分显著低于假手术组(表12-1)。

五、结果分析

假手术组大鼠脊髓未受损伤，BBB评分均为21分。而脊髓半横断后，大鼠脊髓损伤侧后肢运动功能丧失，随着时间推移，BBB评分逐渐升高，表明运动功能有所恢复，但分值显著低于假手术组。本实验成功制备了大鼠脊髓半横断模型。横断侧后肢神经功能有一定程度的代偿恢复，提示脊髓半横断损伤后存在一定的自我修复能力。

六、经验与体会

术中动作要轻柔，进行脊髓半横断时要确保手术成功。术后精心护理，注意保暖，加强营养，防止自残、压疮、感染等，以提高动物存活率。为保证BBB评分的准确性，尽量减少主观因素的影响，需采用单盲法，由3人独立完成。