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建立仙台病毒实时荧光重组酶等温扩增检测方法
2020年03月03日
来源:中国比较医学杂志2019年第12期
作者:冯丽萍 熊炜 高诚 魏晓锋
责任编辑:admin
摘要:国标标准规定清洁级和SPF级小鼠必须排除仙台病毒(Sendai virus,SeV)。为了提升效率,简化操作步骤,本研究建立了一种新型分子检测方法———实时荧光重组酶等温扩增技术(real-time RPA)用于检测SeV。
目的:国标标准规定清洁级和SPF级小鼠必须排除仙台病毒(Sendai virus,SeV)。为了提升效率,简化操作步骤,本研究建立了一种新型分子检测方法———实时荧光重组酶等温扩增技术(real-time RPA)用于检测SeV。
方法:针对SeV融合蛋白编码基因的保守序列,设计特异性扩增引物及探针并建立检测方法,并评价该检测方法的特异性、敏感性、稳定性和可靠性。最后将该检测方法和团标PCR方法进行优势比较。
结果:该方法具有很好的特异性,与小鼠肝炎病毒等六种病原微生物无交叉反应。其敏感性、稳定性和可靠性均可,并能够在25min内完成,远远快于PCR方法。
结论:本研究建立的SeV实时荧光RPA是一种操作简单,高效直观且特异性好的检测方法。
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