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模型制备

实验猪HEV感染模型

2020年01月07日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 作者:周光兴 责任编辑:yjcadmin

(1)模型制作  取人戊型肝炎病毒US-2株,按1.0ml/只的剂量经静脉注射入SPF猪,病毒滴度为104.5。注射感染HEV后第3、7、14、20、27、55天分别取模型猪的肝、扁桃体、肠系膜、支气管、肝淋巴结、小肠、胃、胰腺、脾、唾液腺、心、肺、肾、骨骼肌等组织进行病毒检测,采血作血清 ALT检测。模型猴于实验预定时间,在氯胺酮麻醉下做肝穿刺活检,标本经10%甲醛溶液固定,作常规组织切片,HE染色,光镜下观察。

(2)模型特点  静脉接种病毒后1周,模型猪便出现粪便排毒并可持续至第3周;接种后第6~30日出现血清ALT升高;接种后第3~4周,模型猪肢窝皮肤及巩膜出现黄染。镜下病理组织学观察显示,肝组织内可见急性炎症样改变。感染HEV后第3~20日,模型动物血清中可检测到HEV正链RNA,即使在病毒血症消失后的第20~27日,其组织中也能检测到RNA。接种感染后第3日时HEV病毒即能在模型主顾的扁桃体、小肠、结肠、肝脏、淋巴结等组织中复制;接种感染1~2周以后,在肾脏、唾液腺中也能检测到病毒复制;除肝脏外淋巴结和肠道是HEV病毒主要的复制组织。

(3)比较医学  接种感染HEV后,模型猪肝组织活检可见急性炎症样改变。HEV感染引起的肝模型猪损伤可能是由于机体对病毒的免疫反应所致,而非病毒复制,因为病毒在猪的肠道系统也能大量复制。目前,对HEW的动物实验研究多采用非人灵长类动物感染模型。由于非人灵长类动物价格昂贵,实验条件控制和其他因素的限制较多,严重影响和阻碍了HEV的研究进展。实验猪作为HEV的自然宿主,具有和人类较为相同的HEV感染特征,本模型对临床 HEV流行病学研究、免疫机制及疫苗的研制均具有重大实用价值。

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