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转基因小鼠感染模型
2020年01月22日
来源:《人类疾病动物模型复制方法学》
作者:周光兴
责任编辑:yjcadmin
(1)模型制作 将包含庚型肝炎病毒E2蛋白的外源基因,用显微注射法注入小鼠受精卵雄性前核中,产生HGV E2蛋白转基因小鼠,基因组DNA PCR及Southern blotting证明,该小鼠外源基因可稳定传递。小鼠组织RT-PCR结果表明,HGV基因可以在肝细胞及淋巴细胞内转录;免疫组化结果显示,蛋白表达主要位于肝细胞。常规病理学切片观察,某些转基因小鼠有轻度的肝细胞损伤。
(2)模型特点 HGV E2蛋白主要表达在转基因小鼠肝细胞胞膜上,少量在细胞质内;肾、心、肺及脾组织细胞及肝细胞核的免疫组化染色E2蛋白表现为阴性,而血清转氨酶变化不明显。有的转基因小鼠镜下可见肝细胞水样变性,门管区肝细胞轻度肿胀,肝细胞有局灶性脂肪变性;有的转基因小鼠肝小叶不完整、局部区域有较严重的水样变性;有的小鼠则表现为肝细胞呈梭状,排列紊乱,门管区及肝小叶内有小灶性淋巴细胞浸润等轻度炎症反应。
(3)比较医学 约有50%的HGV E2蛋白转基因小鼠不引起明显的病理变化,血清ALT变化也与临床上人HGV感染的表现不同;而转基因小鼠HGV E2蛋白主要在细胞膜上,与人类HGV自然感染状况相似。HGV E2蛋白转基因小鼠病理组织学改变仅发生在肝脏组织,肾脏、心脏、肺和脾脏组织内未见有异常病理改变,表明HGV基因在转基因小鼠体内的表达似有肝组织特异性。HGV E2蛋白转基因小鼠模型的成功为HGV发病机制及免疫机制的研究提供了新的方法。
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