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模型制备

人巨细胞病毒诱发小鼠宫颈癌模型

2020年02月21日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 作者:周光兴 责任编辑:yjcadmin

(1)复制方法  HCMV AD 169株常规接种HEL(人胚肺)细胞,其感染滴度为10的-6TCID50病毒悬液,当75%以上细胞出现病变时收获细胞,快速冻融3次,以超声波处理10min,1000g×离心10min,弃细胞碎片。将HCMV悬液接种血平皿,经在温度为37℃、观察48h证明无细菌生长后,将病毒悬液暴露在距离为20cm的2个15W紫外光下照12min,灭活病毒悬液。取雌性2个月龄KM小鼠,用小块无菌医用明胶海绵吸取灭活病毒悬液,置小鼠阴道直抵宫颈,每周3次,共8周。光镜检查发现,宫颈上皮增生,有明显的鳞状细胞浸润,小鼠宫颈可连续发生从正常宫颈上皮变成异型性上皮,再继续演变到浸润癌的病理组织学变化。

(2)模型特点  给小鼠反复接种病毒感染后,可诱发模型小鼠宫颈上皮细胞不典型增生及浸润癌。小鼠宫颈癌组织中HCMV抗原阳性率为100%,血清中HCMV抗体滴度达1:167;HCMV接种小鼠的淋巴细胞ANAE阳性率降低,提示HCMV诱癌过程中,小鼠的细胞免疫功能严重受损,该模型适用于HCMV诱癌机理的研究。

(3)比较医学  HCMV反复感染小鼠宫颈以后,小鼠宫颈连续发生了从正常宫颈上皮变成异型性上皮,再继续演变到浸润癌的组织病理变化,和HSV-2感染小鼠宫颈的情况相似,本模型可应用于对HSV诱癌机制方面的研究。

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