目的　 获得稳定高表达人 ＧＰＣ３ 的 ＳＫ-Ｈｅｐ-１ 细胞系。

方法　 构建人ＧＰＣ３ 真核表达载体 ｐｃＤＮＡ３.１-ＧＰＣ３，通过电穿孔的方法转染至ＳＫ-Ｈｅｐ-１细胞，利用Ｇ４１８进行细胞筛选，获得稳定高表达ＧＰＣ３的细胞系，再利用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和流式细胞术进行鉴定，分析稳定转染细胞表面ＧＰＣ３蛋白的表达情况。

结果　 成功构建的真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３.１-ＧＰＣ３，检测发现ＳＫ-Ｈｅｐ-１细胞Ｇ４１８最佳筛选浓度为７００μｇ/ｍＬ，利用该浓度Ｇ４１８ 筛选转染ＳＫ-Ｈｅｐ-１细胞，获得了细胞表面能够稳定高表达人ＧＰＣ３蛋白的ＳＫ-Ｈｅｐ-１细胞系。 

结论　 建立高表达人ＧＰＣ３蛋白的ＳＫ-Ｈｅｐ-１稳定细胞系，为研究靶向ＧＰＣ３肝癌抗体提供了物质基础。 

阅读原文：稳定高表达人ＧＰＣ３的ＳＫ-Ｈｅｐ-１细胞系的构建.pdf