目的　 评估登革病毒实时荧光定量ＲＴ-ＰＣＲ方法，应用于登革热小鼠模型关键指标的检测。

方法     首先，选择合适的特异引物和探针，分子生物方法制备质粒标准品，优化ＰＣＲ体系和反应条件；其次，评估该实时荧光定量ＲＴ-ＰＣＲ方法的灵敏性、特异性及稳定性；最后，验证该方法对登革病毒感染小鼠血清和组织样本的适用性。

结果　 成功确定一步法实时荧光定量ＲＴ-ＰＣＲ方法该，方法较为灵敏，最低检测线为４９.６Ｃｏｐｉｅｓ/μＬ，方法特异性好，未见非特异性扩增，方法稳定性好，样本Ｃｔ值标准差均小于０.５，且ＣＶ<５％，登革病毒感染小鼠模型样品的检测结果符合实验预期。 

结论　 该QRT-PCR方法可作为关键指标检测方法，用于登革热小鼠模型病毒的定量检测及评估。

阅读原文：实时荧光定量ＲＴ-ＰＣＲ方法在登革热小鼠模型中的评估及应用.pdf