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《鼠年说鼠》第十一期:如何选择PCR反应体系?

2020年05月13日 浏览量: 评论(0) 来源:赛业生物 作者: 责任编辑:admin
摘要:基因工程小鼠基因型PCR鉴定的基本原则是利用基因工程小鼠基因组与野生型小鼠基因组的序列差异,以小鼠基因组DNA为模板进行PCR,并以凝胶电泳比对比不同基因型特异产物的大小,根据条带大小来区分小鼠的不同基因型。今天我们就开始第十一期的内容吧——如何选择PCR反应体系~

《鼠年说鼠》系列文章,专门解答大小鼠铲屎官们在养鼠过程中经常遇到的繁育与鉴定类的问题,同时向大家征集问题,任何基因编辑鼠饲养繁殖或鉴定的困惑统统可以丢给小赛,小赛会给您回复或统一在后面的内容为大家做出详细的解答。

基因工程小鼠基因型PCR鉴定的基本原则是利用基因工程小鼠基因组与野生型小鼠基因组的序列差异,以小鼠基因组DNA为模板进行PCR,并以凝胶电泳比对比不同基因型特异产物的大小,根据条带大小来区分小鼠的不同基因型。今天我们就开始第十一期的内容吧——如何选择PCR反应体系~ 

《鼠年说鼠》第十一期:如何选择PCR反应体系?

 2条引物扩增小于1kb的片段体系 

2条引物扩增小于1kb的片段体系

备注:如果需要3条引物,则以1:1:1的比例,ddH2O减少,总体积不变。 

4条引物扩增小于1kb的片段体系 

4条引物扩增小于1kb的片段体系

 LongAmp聚合酶的体系 

LongAmp聚合酶的体系

 短片段PCR 程序 

短片段PCR 程序

备注:根据条带大小来确定延伸时间(诺唯赞P112-01是60s/kb,P222是20s/kb)

 LongAmp聚合酶的PCR程序 

LongAmp聚合酶的PCR程序

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下期内容预告

PCR胶浓度、电泳电压及时间的选择

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