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熊果酸通过抑制自噬对血清剥夺诱导的H9c2细胞起抗凋亡作用
目的 冠状动脉粥样硬化心脏病( coronary atherosclerotic cardiopathy)造成的心肌缺血(myocardial ischemia)严重威胁人类生命安全,本研究从细胞水平阐述了熊果酸( ursolic acid,UA)对血清剥夺心肌细胞自噬和凋亡的作用。
方法 体外培养大鼠H9c2 心肌细胞。分为对照组、血清剥夺组、熊果酸处理组、自噬抑制剂 3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理联合熊果酸组、雷帕霉素预处理联合熊果酸组。流式细胞术检测细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹检测自噬相关蛋白 LC3、 Beclin1、 ATG5 以 及 凋 亡 相 关 蛋 白 cleaved-caspase3、 BcL-2、 Bax 的 表 达。
结果 10 μmol/L熊果酸为处理 H9c2 细胞的最适浓度,血清剥夺能造成 H9c2 细胞 LC3 II/I 比值、Beclin1 和 ATG5 表达增 加(P<0.01),熊果酸处理后能降低其表达(P<0.05),血清剥夺造成 H9c2 细胞凋亡率增加(P<0.001),熊果酸处理 后能降低凋亡率(P<0.01),3-MA 预处理组能进一步降低凋亡率(P<0.001),而雷帕霉素预处理组凋亡率上升(P<0.001),血清剥夺能造成 H9c2 细胞 cleaved-caspase3 表达量、Bax/BcL-2 比值升高(P<0.001),熊果酸处理后抑制了血清剥夺造成的 cleaved-caspase3 的表达量和 Bax/BcL-2 比值升高(PP<0.01),3-MA 预处理组能进一步降低 cleaved-caspase3 的表达量和 Bax/BcL-2 比值(P<0.001),雷帕霉素预处理组 Bax/BcL-2 比值回升(P<0.05)。
结论 熊果酸对血清剥夺 H9c2 细胞的抗凋亡作用与抑制自噬有关。
阅读原文:熊果酸通过抑制自噬对血清剥夺诱导的 H9c2 细胞起抗凋亡作用.pdf
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