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首都医科大学陈振文教授团队首次利用CRISPR/Cas9技术建立长爪沙鼠基因编辑体系
2020年7月,首都医科大学基础医学院陈振文教授团队在《Frontiers in Bioengineering and Biotechnology》在线发表题为“Generation of Gene-knockout Mongolian Gerbils via CRISPR/Cas9 System”的论文。该研究在国际上首次利用CRISPR/Cas9技术建立了长爪沙鼠基因编辑技术体系,并成功获得Cystatin C 和Apolipoprotein A-II 两种基因敲除长爪沙鼠。基础医学院硕士研究生王妍为第一作者,李长龙副教授和郭萌副教授为共同通讯作者。
长爪沙鼠(Meriones unguiculatus)是源自我国的“多功能”实验动物,已广泛应用于生命科学和生物医药等诸多研究领域,特别在听觉、脑血管疾病和幽门螺杆菌感染等研究中具有明显优势。陈振文教授团队长期从事长爪沙鼠实验动物化和模型机制研究,已成功培育1个封闭群及自发糖尿病和脑血管畸形2个近交系,完成了长爪沙鼠基因组de novo测序工作。然而,由于缺乏基因编辑平台极大制约了长爪沙鼠相关研究的深入。长爪沙鼠实验动物化时间短,其“一夫一妻”制的繁殖方式及特殊的生殖器官等特性,使长爪沙鼠胚胎获取和操作异于其它啮齿类动物。
陈振文教授团队经过多年探索,优化了长爪沙鼠胚胎操作技术流程,建立了高效CRISPR/Cas9基因编辑体系,并获得Cystatin C 和Apolipoprotein A-II 两种基因敲除长爪沙鼠。同时,该研究还利用脑缺血模型明确了Cystatin C缺失加剧长爪沙鼠缺血后脑损伤,并从功能上验证了这一基因的成功敲除。
长爪沙鼠CRISPR/Cas9基因编辑体系的建立为长爪沙鼠基因功能研究奠定了基础,同时为长爪沙鼠生物学特性研究、比较生物学研究以及利用长爪沙鼠制作人类疾病动物模型研究提供了强有力的工具。
本研究得到国家自然科学基金(31672375, 31872308, 31970512, 31572348)和“十二五”国家科技支撑计划项目(2015BAI09B00)资助。
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