猪的生物学特性和遗传特性与人类具有相当高的同缘性。有关小型猪的研究国内外学者已有较多报道，但是关于WZSP近交系GH和IGF-I含量的测定未见有报道。本研究通过对其进行血清GH和 IGF-I含量的测定，探讨大白猪与WZSP近交系血清GH含量与IGF-I含量的差异，为其体型的矮小性状寻找表型证据。

(一)实验材料

实验材料所用的3月龄大白猪血样12份(6公6母)，取自河北省三河市明慧养猪公司；3月龄 WZSP近交系血样12份(6公6母)，取自中国农业科学院北京畜牧兽医研究所五指山猪保种场。采用分子遗传学的常规仪器和试剂，如：猪GH和IGF-I酶联免疫检测试剂盒，购自美国RD公司。

(二)实验方法

猪血清的分离：血液在室温下自然凝固10～20min后，离心(3000r/min)20min，收集上清液。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

猪血清GH和IGF-I采用美国RE)公司的Elisa检测试剂盒进行测定，具体操作步骤如下：

(1)试剂盒平衡至室温进行试验，取一96孔酶标板，加入20μL标准品、血清标本于相应反应孔中。

(2)每孔加入200μL酶联物，轻轻混匀30s，不封板，室温60min。

(3)洗板：甩尽板内液体，用洗涤液洗涤反应板(每孔内加入350μL洗涤液)，并去除水滴(在吸水纸上拍干)，反复洗涤5次。

(4)每孔加入100μL显色液，轻轻混匀10s，室温温育15min。

(5)每孔加入100μL终止液，轻轻混匀30s，60min内在450nm处读OD值。

以OD值为纵坐标，以标准品浓度为横坐标，绘制标准曲线。根据血清样品的OD值可在标准曲线上查出浓度。

数据分析采用SAS软件的T检验程序进行。

(三)结果与分析

根据标准品浓度梯度测得的OD值绘制的标准曲线图如图1-40和图1-41所示，从标准曲线图可以看出标准曲线比较科学、合理，保证了测定结果的准确性和真实性。

从表1-44中可以看出，虽然WZSP近交系血清GH浓度略低于大白猪，但二者之间差异不显著(P＞0.05)；而WZSP近交系血清IGF-I浓度明显低于大白猪，达到显著水平(P＜0.05)。

从表1-45中可以看出WZSP近交系公猪、母猪血清IGF-I水平均低于大白猪，特别是WZSP近交系母猪血清IGF-I水平显著低于大白猪母猪(P＜0.05)。

(四)讨论

3月龄的大白猪体重(40～45kg)与WZSP近交系体重(12～15kg)之比为3：1，GH含量基本一致，无显著性差异(P＞0.05)。本实验测得的血清GH含量比姚惠娟等(2002)和鲍世民等(2002)的研究结果要低，这可能是由于GH脉冲式释放的原因所致。GH是由脑垂体前叶分泌的单链多肽，它直接作用于全身的组织细胞，可增加细胞的体积和数量，并与其他垂体激素协作以保证个体正常的生长。GH水平生理性平衡主要保证个体正常生长发育，如果GH水平病理性失衡，可导致巨人症或侏儒症等临床症状。

GH作为神经内分泌生长轴的主体激素，它的作用是通过IGF-I介导的。IGF-I是胰岛素样生长因子家族中的一员，主要由肝细胞合成和分泌，对机体生长发育起着重要调节作用(Twigg and Baxter，1998；Rosen and Pollak，1999)。pIGF-I的生物学功能主要包括介导生长激素的促生长作用；促进体脂的合成、乳腺和卵巢的发育；以及促进某些性腺分泌性激素。IGF-I在不同品种猪中的浓度也有差异，一般来说，生长速度快的猪高于生长速度慢的猪(Clutter等，1995)。WZSP近交系的血清 IGF-I浓度显著低于同月龄的大白猪(P＜0.05)，这主要是由于五指山近交系母猪的血清IGF-I水平显著低于大白猪母猪所造成。作为生长性状的候选基因，WZSP近交系血清IGF-I的缺乏必将影响到其生长速度以及性状。这与人的Laron综合征的临床特点比较相似，Laron综合征患者临床特点表现为躯体生长迟缓，身材矮小明显，实验室检查血清GH正常或升高，血清IGF-I浓度明显低于正常人。