蛋白表达系统介绍(二)
了解蛋白表达系统
制备高质量、高纯度、高天然、保真性蛋白,是许多实验关键性的第一步,蛋白表达系统的选择就显得十分重要。 更多内容>>
蛋白表达系统简介及优势劣势对比:
1.原核表达系统:以大肠杆菌或枯草杆菌为宿主的表达系统。
2.酵母表达系统:以毕赤酵母或酿酒酵母为宿主的表达系统兼具部分原核蛋白表达特征和部分真核蛋白表达特征。
3.昆虫表达系统:昆虫细胞表达重组蛋白涉及两代病毒的制备工作,简称为P1和P2代。P1代病毒主要是用于蛋白表达预实验以及扩增P2代病毒,P2代病毒用于大规模蛋白表达制备服务
4.哺乳动物表达系统;哺乳动物蛋白表达系统适用于科学家对天然构象蛋白的体外重组表达需求,如糖基化修饰,磷酸化修饰等。
表达系统 | 优势 | 劣势 |
原核表达系统 | 遗传背景清楚、操作简单、应用广泛、时间短、成本低、表达量高、可大规模生产 | 包涵体、蛋白无翻译后修饰、蛋白分泌量少、大分子量蛋白表达困难 |
酵母表达系统 | 时间短,表达量高、成本低、生产迅速、培养条件简单、大部分蛋白可正确折叠、部分拥有翻译后修饰 | 非人源糖基化、部分产物易降解、表达量不可控 |
昆虫表达系统 | 表达速度快、表达水平高,表达蛋白正确折叠、具有翻译后修饰、无内毒素、可溶蛋白、适合毒性蛋白、安全性高 | 周期长、成本高、缺少部分糖基化、病毒侵染会造成部分细胞裂解和部分表达蛋白降解 |
哺乳动物表达系统 | 表达迅速,更快表达膜蛋白和分离蛋白、表达蛋白可折叠、翻译后修饰、蛋白活性高 | 周期长、成本高、生产速度慢 |