急性内脏炎症疼痛模型
1.造模材料 动物:健康Wistar大鼠,雌雄不限,体重240~270g;药物:乙醚,5%甲醛溶液,生理盐水;器械:直肠窥器。
2.造模方法 乙醚气体维持大鼠麻醉,使用37℃温热生理盐水冲洗直肠内粪便,然后由肛门插入特制直肠窥器,在目视条件下,距直肠缘35mm于黏膜下注射0.1ml 5%甲醛或0.1ml生理盐水。注射时注意不能穿透乙状结肠壁。注射完毕缓缓退出直肠窥器,撤去麻醉,将动物置于观察笼内。
几种固定行为反应可反映内脏痛:舔腹部或外阴区域大鼠呈现蹲位,双后肢轻度外展,头部伸向下腹部,反复舔下腹部或外阴区域,或者头部扭向后肢外侧,舔臀部外侧或后肢,表现较平静,受惊扰则停止动作;腹部收缩,大鼠以后肢站立,腹部收缩背部弯曲高耸,身体重心向前,臀部抬离地面,有时伴有身体晃动,表现较平静,受惊扰不停止动作。伸展身体,大鼠以前肢支撑身体,后腹部平贴地面,后肢后伸,整个身体伸长,肌肉紧张伴有颤抖,表现痛苦,受惊扰不停止动作;肋腹部收缩,大鼠整个身体平贴地面或以前肢支撑身体,后腹部平贴地面,由脸面观察双下肢内侧并拢,肋腹部强烈收缩,呈现明显凹陷,伴有颤抖或身体扭曲,有时同时伴有伸展身体,表现痛苦,受惊扰不停止动作。
3.造模原理 甲醛致炎症引起的内脏疼痛行为反应。
4.造模后的变化 造模大鼠在麻醉状态下,在乙状结肠壁黏膜下注射甲醛,麻醉恢复后即开始出现内脏痛的行为反应,同一种行为反应呈现随时间变化的动态趋势。实验中观察到,在前1h内主要表现为肋腹部收缩(F)、伸展身体(B)、腹部收缩(A),间而穿插有舔腹部或身体外周区域(L),但出现频率极低,1h后L则成为主导行为反应。
注射甲醛30min后造模大鼠的病理切片上,可以观察到在注射区域形成局部溃疡,表面黏膜绒毛水肿破裂,失去正常形态结构,并且在黏膜表面有深染的炎症细胞渗出,黏膜下有局部血肿和大量深染的炎症细胞浸润,形成团块状。黏膜肌层和浆膜层形态完整。注射点周围细胞坏死溶解,整个注射区域炎症反应强烈。