目的 通过腺病毒（Ad）载体感染过表达骨形态发生蛋白4BMP-4），研究BMP-4对兔骨髓间充质干细胞BMSCs）体外增殖和成软骨的影响。

方法 全骨髓贴壁法分离获取BMSCs，传代培养提升细胞纯度，通过细胞形态学及流式细胞术测定表面分子标志物以鉴定细胞;设立病毒感染复数（MOI）梯度组，通过倒置相差显微镜和流式细胞仪确定最佳MOI;酶联免疫吸附试验（ELISA）及蛋白印迹法分析过表达BMP4对细胞分泌Ⅱ型胶原（COLL Ⅱ）、性别决定基因盒9（Sox9）和BMP-4的影响;细胞计数试剂盒8（CCK-8）法鉴定过表达BMP-4对BMSCs体外增殖的影响。

结果 原代细胞呈圆形、椭圆和梭形不等，第2代细胞呈典型成纤维样长梭形，漩涡状分布，低表达造血干细胞表面分子标志物CD34（1.94%）和CD45（2.13%），高表达CD44（98.2%）、CD29（99.7%）和CD90（98.8%）。MOI为100时，病毒感染效率较高，且对细胞损伤最小，为最适MOI。与对照组相比，过表达BMP-4能显著促进BMSCs的增殖，并能分泌成软骨特异指标COLL Ⅱ、BMP-4及Sox9（P<0.05）。

结论 过表达BMP4能显著促进BMSCs的增殖及向软骨分化。

阅读原文：过表达骨形态发生蛋白4对兔骨髓间充质干细胞增殖与成软骨的影响.pdf