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草氨酸钠对胆管癌细胞自噬与凋亡的影响
2021年02月04日
来源:《实验动物与比较医学》2020年第5期
作者:何大伟 何敖林 周明慧 于亚平 张明华
责任编辑:admin
摘要:观察乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)抑制剂草氨酸钠对人胆管癌细胞株Hucct-1自噬与凋亡的影响,并初步探讨其相关机制。
目的 观察乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)抑制剂草氨酸钠对人胆管癌细胞株Hucct-1自噬与凋亡的影响,并初步探讨其相关机制。
方法 用不同浓度的草氨酸钟处理Hucct-1细胞,或将LDHA小干扰RNA转染Hucct-1细胞后,CCK8法检测细胞增殖,济式细胞术检测细胞凋亡,划痕愈合实验检测细胞迁移,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测自噬相关mRNA和蛋白的表达水平,乳酸检测试剂盒检测细胞内乳酸的含量。
结果 草氨酸钠抑制Hucct-1细胞增殖(P<0.01),并呈剂量依赖性,其半数抑制浓度为50mmol/L用50mmol/L草氨酸钠干预Hucct-1细胞或LDHA小干扰RNA转染Hucct-1细胞后,LDHAmRN和蛋白表达水平均降低(均P<0.01),细胞内乳酸的含量减少(P<0.01),细胞凋亡率升高(P<0.01),细胞迁移距离缩短(P<0.01),细胞中自噬相关基因7(autophagy-related gene 7, ATG7)、Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3Ⅱ,LC-3Ⅱ)表达水平升高(均P<0.01),P62蛋白表达水平降低(P<0.01)。
结论 羊氨酸钠通过抑制Hucct-1细胞中LDHA表达来促进细胞自噬,诱导细胞凋亡。
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