【操作步骤】选体重200～250g的大鼠，饲喂固型饲料。从隐球菌感染的患者的脊髓液或尿中采取菌种，进行传代培养，培养的代数越多隐球菌的荚膜越厚，毒性也越强。37℃，甘露醇琼脂培养液中对隐球菌进行培养至对数生长期，用生理盐水50倍稀释，由鼠尾静脉注射0.5ml，立即向腹腔内注射道诺霉素0.4mg/kg体重，这种方法能使隐球菌很容易地在动物体内存活并增殖。也可预先将道诺霉素0.4mg/kg体重注入动物腹腔，7～15d后，用戊巴比妥钠50mg/kg体重麻醉大鼠，打开腹腔，由肝总动脉注入50倍稀释的隐球菌0.1～0.3ml，用手指压迫肝动脉，防止菌液流入肝脏，注射完毕缝合腹腔，精心护理，提高存活率。

【结果分析】用道诺霉素对大鼠进行前期处理后，由尾静脉注入隐球菌，7d后动物食欲开始减退，瘦弱，体毛粗、硬度增加，并失去活力。15d后静脉注射葡萄糖(0.5g/kg)进行耐糖试验，结果见实验组的动物耐糖能力比对照组的正常动物低，对胰岛素的反应也减弱。耐糖试验及病理取材，观察隐球菌在体内的存在部位，可观察到：①胰脏的外分泌部只存有极少量的隐球菌，胰岛内或其周围组织却附着有很多的隐球菌。隐球菌易于附着的部位主要是胰岛的网状组织，但也可能附着于胰岛一腺泡等部位。附着于这些部位的隐球菌直径为3.5～4.6μm，比附着在人红细胞的隐球菌要小，目前对这种现象还难以解释。胰岛内的隐球菌四周可见有淋巴细胞、单核细胞浸润，呈现出纤维性增殖现象，内分泌细胞变性、坏死，出现肉芽肿。②肺组织中通常由10～15个隐球菌形成一个集落，呈慢性肺炎样变化。③肝小叶内可见有极少的隐球菌，细菌的四周也像在胰岛内那样，出现淋巴细胞等炎性细胞浸润，往往伴有肝细胞坏死。④肾组织中隐球菌主要附着于肾小管腔。

从大鼠的尾静脉注射的隐球菌会随血流分散到多个脏器中，不易引起胰岛特异性的炎症，因此，可对大鼠实施开腹手术，用手指压迫肝动脉，由肝总动脉注射隐球菌，使胰岛出现损害。结果在肝、肾、肺等脏器中几乎见不到隐球菌，大部分隐球菌向胰腺外分泌部扩散。因此，经肝总动脉注射隐球菌时，需要以缓慢的速度注射，把压力限制在最小的程度。

【注意事项】

(1)注射隐球菌后，要用塑料布覆盖饲育箱底部，动物的排泄物(主要是尿液)要随塑料布一起烧掉，用具要彻底杀菌消毒。

(2)隐球菌的培养最好用甘露醇琼脂培养液，培养温度为37℃。培养出来的细菌可能大小不一，5～30μm大小的都有，一般为5～10μm。本菌可用其产生的尿素酶来鉴定。