动物生物安全二级水平实验室适用于对人及环境有中度危害的微生物实验工作。与一级生物安全水平相比，其不同点在于：①工作人员要经过操作病原微生物的专门培训，并由能胜任的专业人员进行指导和管理；②工作时限制外人进入实验室；③某些产生传染性气溶胶或溅出物的工作要在生物安全柜或其他物理隔离设备内进行；④对污染的锐器采取高度防护措施；⑤要注意有些感染是通过消化道、皮肤和黏膜造成的，在操作上要特别注意。

ABSL-2是在ABSL-1的操作规范、处理方法、安全设备和实验室要求的基础上建立起来的。产生气溶胶的操作程序，要在生物安全柜内进行。门保持关闭，门上悬挂公害标志牌，有害污染废弃物要和一般废弃物分开放置。

1.设施设备要求

(1)适用时，应符合动物生物安全一级防护水平的要求。

(2)动物饲养间应在出入口处设置缓冲间。

(3)应设置非手动洗手池或手部清洁装置，宜设置在出口处。

(4)应在邻近区域配备高压蒸汽灭菌器。

(5)适用时，应在安全隔离装置内从事可能产生有害气溶胶的活动；排气应经HEPA过滤器的过滤后排出。

(6)应将动物饲养间的室内气压控制为负压，气体应直接排放到其所在的建筑物外。

(7)应根据风险评估的结果，确定是否需要使用HEPA过滤器过滤动物饲养间排出的气体。

(8)当不能满足(5)时，应使用HEPA过滤器过滤动物饲养间排出的气体。

(9)实验室的外部排风口应至少高出本实验室所在建筑的顶部2m，应有防风、防雨、防鼠、防虫设计，但不应影响气体向上空排放。

(10)污水(包括污物)应消毒灭菌处理，并应对消毒灭菌效果进行监测，以确保达到排放要求。

2.标准微生物学操作规范

(1)动物实验室主任必须制定动物管理操作和进入动物实验室应遵循的规章、程序和方法。为处理紧急事故，还应制定应对意外事故的规章，对策和处理办法。

(2)限制进入动物实验室人员的数量，越少越好。在实验工作进行之前，实验室负责人要告知进行操作和辅助工作人员，实验室内可能发生和存在的潜在生物危害。

(3)实验室应制定适当的医学监督和监测方案。所有工作人员，对其正在进行实验的病原微生物或潜在感染的疾病(如乙型肝炎、结核等)，应接受及时的免疫接种和必要的检测试验。

(4)在工作区内不允许饮食、吸烟、处理隐形眼镜片和使用化妆品。食物储藏只能在指定的区域内，不允许在动物实验室或处理室内存放。

(5)操作应仔细小心，使气溶胶和溅射物产生减至最低限度。

(6)处理与传染物有关的工作结束后，特别是当传染物明显溢出，溅出或受传染材料污染后，实验室设备和工作台面应用有效消毒剂进行常规的除污消毒。然后再送去修理或维护保养。

(7)对全部传染性样品都要进行详细收集，明确标注，稳妥运输和仔细处理，以杜绝有害病原体向外界传播。从动物实验室收集到的所有废弃物包括动物组织、尸体、污染垫料、没吃完的饲料、锐器和其他废物，都要放在一个密封、有盖的容器内，然后按规定进行严格处理。装废料的容器表面在倒出废料之前要消毒。如废料进行燃烧处理，处理前废料要进行高压灭菌。

(8)制定处理锐器的安全措施包括：①针头和注射器或其他锐利器材严格限制在动物实验室内使用，只在无可替代的器材时才能使用，如非肠道注射药物，静脉切开放血，抽取实验动物体液，以及从有隔膜的瓶子里吸出液体等。②只能用固定针头或一次性注射器，注射或抽取感染性材料。使用过的一次性针头不要弄弯，截断，损坏，应重新套上保护套管，从注射器上取下。在抛弃之前，不要用手接触。换言之，它们必须小心地放置在方便、穿不透的用来存放锐器的盒子里。不能抛弃的锐器必须放在专用的硬容器内，在转移到消毒区之前，最好先进行高压灭菌。③不要用手直接处理破碎的玻璃制品，要用刷子、簸箕、夹子或镊子等工具。装有污染针头、锐器和破碎玻璃的容器，根据规定，在丢弃之前要消毒。④培养物、组织或体液标本在收集、处理、加工、贮存、运输期间要放在防漏的容器里。尽量用塑料制品，不用玻璃制品。

(9)在处理完培养物和动物，脱掉手套之后，离开实验室之前，要洗手。

(10)在进行有传染病原体实验的动物实验室入口处，要悬挂注明“有危害”的警告标牌。危险警告标志牌上要标明现用的传染病原体，实验室负责人姓名和电话号码，以及其他特殊要求(包括进入动物实验室要免疫预防注射，佩戴呼吸面罩等)。

(11)有效控制蚊蝇及啮齿类动物。

3.特殊操作规范

(1)要编制生物安全手册。要向有关人员告知实验的特殊危险并要求他们阅读和遵循相关规范和程序。实验室人员要接受培训，内容为与工作有关的潜在危险，防止暴露的必要措施和评定暴露感染的程序。人员每年要接受上述内容的新培训，或根据程序或政策的变化另外进行培训。培训记录要妥善保存。

(2)实验室负责人要限制进入实验室的人员。在一般情况下，微生物实验室或动物实验室内不允许易被感染或感染后可能会有非常危险的人员进入。实验室负责人根据具体情况，确定哪些人可以进入实验室或在其中工作。

(3)实验室应制定相应规则和程序，只允许那些了解潜在生物危险并符合进行特殊实验规定(如免疫)的人员进入实验室或动物实验室。

(4)实验室内应穿外衣、长服、工作服或制服，离开实验室到非实验区(休息室、图书室、办公室)时，应脱下防护服，或罩上未在实验室内用过的清洁外衣。

(5)进行实验无关的动物不允许放在实验室内。

(6)发生明显感染性材料的溢出和其他事故时要及时报告实验室主任，并立即进行危险评估、监督处理，并保存记录。